Colombia es un país megadiverso no sólo en vida silvestre sino también en riqueza cultural y diversidad étnica. Con la llegada de los españoles, el subsecuente arribo de grupos procedentes de África y un posterior mestizaje con una población indígena diezmada, Colombia se constituyó en un país caracterizado por una variedad de culturas, símbolos, tradiciones, costumbres, artes, conocimientos y de saberes. Cabe resaltar que pese al largo período de existencia de Colombia como nación libre y soberana, a nivel genético, es muy poco lo que se conoce sobre los grupos étnicos que la constituyen. La gran mayoría de estudios biológicos se han concentrado en los grandes centros urbanos como Bogotá, Medellín, Cali y Barranquilla sin considerar aún regiones con una gran diversidad étnica como es el caso de los departamentos de Tolima y Huila, donde coexisten diferentes grupos humanos, quienes desde la prehistoria hasta el presente, han vivido diferentes procesos demográficos y culturales que aún no han podido ser suficientemente caracterizados. Es por esta razón que esta investigación tuvo como objetivo principal caracterizar la población humana de estos departamentos desde las perspectivas Genética uniparental de cromosoma Y, Demográfica y Sociocultural. Se encontró una región diversa desde el punto de vista genético, con representación mayoritaria de los linajes europeos comunes de la población de península Ibérica y linajes nativos americanos, con haplotipos únicos que a la fecha no han sido reportados. Es además, una población dinámica que está creciendo, en promedio nacen 3 a 4 niños y que se mueve sin restricción a lo largo del territorio colombiano. Posee un 92% de apellidos distintos lo cuál también refleja la diversidad cultural de la zona. En conclusión los departamentos de Tolima y Huila albergan una población móvil con un gran riqueza de linajes de cromosoma Y que reflejan la dinámica histórica de la región.Abstract. Colombia is a very diverse country, not only in wildlife but also in ethnic diversity and cultural wealth. With the arrival of the Spanish, the subsequent coming of groups from Africa, and the ensuing admixture with a decimated indigenous population, Colombia constituted itself in a country characterized by a variety of cultures, symbols, traditions, customs, arts, wisdom and knowledge. It’s worth noticing that in spite of the long period of existence of Colombia as a free and sovereign nation, little is known, genetically, about the ethnic groups that constitute it. Most of the biological studies have focused in the great urban centers like Bogotá, Medellín, Cali and Barranquilla, without considering regions with a great ethnic diversity, such as Tolima and Huila, where different human groups coexist, which since prehistory to the present, have experienced different demographic and cultural processes that have not still been characterized. Because of these reasons, the main objective of this research was to characterize the human populations in these regions according to the uniparental genetics of the Y chromosome and from a demographic and sociocultural perspective. We found a genetically diverse region, in which the most represented were European lineages common in the Iberian Peninsula and native American lineages with not previously reported haplotypes. Additionally, it’s a dynamic population that is growing on an average of 3 to 4 children and it’s moving with no restriction all over the Colombian territory. It has 92% of different surnames, which further reflects the region’s cultural diversity. In conclusion, the Tolima and Huila departments have a mobile population with a great variety of chromosome Y lineages that reflect the historical dynamics of the region.