Estudios preliminares en la estandarización de un protocolo para la obtención de callos embriogénicos en dos clones de caucho (hevea brasiliensis müll. arg.) de diferentes orígenes geográficos

Abstract

Se investigó la influencia de los reguladores de crecimiento para la obtención de callos friables en caucho (Hevea brasiliensis Müll. Arg.) sin llegar a obtenerse regeneración de plántulas. En todos los ensayos realizados en este estudio, se utilizaron dos clones de diferentes orígenes geográficos: el FX 3864 (suramericano) y el PB 254 (asiático). Para los diferentes tratamientos se utilizaron como explantes hojas jóvenes e integumento de semillas de ocho a diez semanas de edad de ambos clones, los cuales se cultivaron inicialmente en los medios MH (Carron, et ál., 1989), MH modificado (Montoro, et ál., 1993, 2000) y el MS modificado (Carron, et ál., 1992), sin obtener ninguna respuesta a los 25 y a los 50 días. Sin embargo, se realizaron otros ensayos con el integumento en el medio de cultivo MS (Murashige and Skoug,1962) modificado con la adición de 0.67 mg/L de BAP y 0.66 mg/L de 2-4 D, como medio para la iniciación de embriogénesis, observándose a los 25 días la formación de callos friables y de color blanco, en los dos clones seleccionados. Estos callos fueron subcultivados en medio MS (1962) suplementado con 0.35 mg/L de BAP y 0.2 mg/L de 2-4 D como medio de expresión de callogénesis, observando a los 50 días expresión embriogénica en ambos clones. Igualmente se obtuvo callo friable de color blanco a partir de hojas jóvenes en los dos clones en medio de cultivo MS suplementado con 1.0 mg/L de BAP, 1.0 mg/L de ANA pero sin IBA y kinetina a los 25 días. Callos subcultivados en el mismo medio suplementado con 0.5 mg/L de BAP y 0.5 mg/L de ANA, presentaron una mejor consistencia de callo friable después de 50 días de cultivo. Este trabajo es un informe parcial de un macroproyecto sobre la optimización de un protocolo para la multiplicación de caucho (Hevea brasiliensis) vía embriogénesis somática.

The influence of growth regulators on obtaining friable rubber (Hevea brasiliensis Müll. Arg.) calluses with no plant regeneration as investigated. Two clones having different geographical origin were used in all trails carried out in this study: FX 3864 (South-American) and PB 254 (Asian). Young leaves and eight- to ten-week-old seed integument from both clones were used as explants in several experiments; they were initially cultured in MH medium (Carron, et ál., 1989), modified MH medium (Montoro, et ál., 1993, 2000) and modified MS medium (Carron, et at,. 1992), no positive response being obtained by days 25 or 50. However, other trials were carried out with the integument in modified MS medium (1962), 0.67 mg/L BAP and 0.66 mg/L 2-4 D being added as medium for initiating embryogenesis, the formation of white, friable calluses being observed by day 25 in the two selected clones. These calluses were sub-cultured in MS supplemented with 0.35 mg/L BAP and 0.2 mg/L 2-4 D as callogenesis expression medium, embryogenic expression being observed in both clones by day 50. Equally friable white calluses were obtained from young leaves in the two clones in MS medium supplemented with 1.0 mg/L BAP, 1.0 mg/L ANA but without IBA and kinetin by day 25. Calluses sub-cultured in the same medium supplemented with 0.5 mg/L BAP and 0.5 mg/L ANA began to show increased friability after 50 days. culture. This work is a partial report of a macro-project for optimising a protocol for rubber (Hevea brasiliensis) multiplication by somatic embryogenesis.