Separación rápida de leucocitos de sangre periférica
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Type
Artículo de revista
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EspañolPublication Date
1994Metadata
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La obtención rápida de leucocitos de sangre periférica ha sido posible gracias al desafío y construcción de una cámara receptora (esterilizable químicamente). Inmediatamente se ha tomado la muestra de sangre anti-coagulada (3 ml) con una jeringa plástica, esta se acopla a la cámara receptora previamente llena de ficoll-hypaque. Durante la centrifugación los eritrocitos pasan lenta y gradualmente a la cámara receptora y los leucocitos que dan en la jeringa en la zona de exclusión o interface (plasma/ficoll-hypaque). La obtención de los PBL se realiza desacoplando la jeringa de la cámara para proseguir el lavado y purificación de las células por separado, ahorrando tiempo y reduciendo en lo posible el contacto de los leucocitos con superficies adherentes o posibilidades de contaminación. EI desafío de esta nueva cámara permite obtener leucocitos sin contaminación eritrocitaria y economiza tiempo para el procesamiento de muestras sanguíneas.Summary
Periferal Blood Leucocites, PBL, can be easily separatedfrom Red Blood Cells (RBC), using a ficoll-hypaquedensity gradient. A three ml plastic syringe with 3ml of anticoagulated peri feral blood is readely attachedto the sterilized cell chamber full of a density gradientsolition. This device thus assembled is centrifuged,(500 - 2.500 rpm), for 20 minutes and the RBC arereadely separated. PBLs retained at the plasma/ficollhypaqueinterphase in the plastic syringe are isolatedfollowing standard protocols and used for clinical orbiological test (HLA, microcitotoxic technique ,etc.).Details of the cell chamber are given. This procedureyields optimun PBL without other cell contaminantsand can save time in skilfull hands.Keywords
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