Caracterización fenotípica y genotípica de aislamientos colombianos de Neisseria gonorrhoeae, recuperados a través del programa nacional de vigilancia por laboratorio, 2013-2014

Abstract

La gonorrea es una enfermedad de transmisión sexual la cual es ocasionada por la bacteria Neisseria gonorrhoeae. Esta infección representa un problema serio de salud pública global, debido la aparición, incremento y dispersión de cepas con resistencia a los antimicrobianos. Adicionalmente, existen otras problemáticas asociadas, como la falta de síntomas en algunas mujeres, el desconocimiento de la enfermedad, el tratamiento sindromico, y el sub-registro. En Colombia, el Instituto Nacional de Salud (INS) desarrolla desde el año 1983 un programa de vigilancia voluntaria por laboratorio de N. gonorrhoeae, en base a esto se realizó el presente estudio, con el objetivo de caracterizar fenotípica y genotípicamente los aislamientos de N. gonorrhoeae, enviados al INS por los Laboratorios de Salud Pública (LSP) durante el periodo 2013-2014. Los aislamientos reportados durante el periodo de estudio, se recibieron de 19 entidades de salud del país, los cuales fueron confirmados mediante las pruebas fenotípicas, se determinó la sensibilidad antimicrobiana de acuerdo a los parámetros del Clinical Laboratory Standards Institute CLSI y la caracterización genotípica se realizó mediante las técnicas de electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE), Ng MAST y PCR para la identificación del gen TEM. Se recibieron 246 aislamientos, pero solo fue posible aislar y confirmar la bacteria en 126 (58,53 %). Estos aislamientos provenían de Bogotá 62 (25,2 %), Antioquia 54 (21,9 %), Amazonas 47 (19,1 %) y Risaralda 33 (13,4 %). De los aislamientos recibidos, 188 (76,42 %) eran de hombres, 58 (23,57 %) de mujeres, 50 (20,33 %) eran de menores de 15 años, de los cuales 37 (63,79 %) se aislaron en niñas. La resistencia a penicilina, tetraciclina y ciprofloxacina fue de 65,8 %, 42,8 % y 29,4 %, respectivamente. La multirresistencia se presentó en 14 (11,11 %) aislamientos. Se encontraron 13 fenotipos de resistencia de los cuales el más común fue N. gonorrhoeae productora de penicilinasa (PPNG) (34/126; 26.98%). La PFGE agrupó 110 aislamientos en 17 grupos, con 54 patrones diferentes; los 16 aislamientos restantes no relacionaron genéticamente. El grupo más común fue el A, con 19 (15,1 %) aislamientos, la mayor parte de estos presentaron el fenotipo de resistencia PPNG. La prueba de Ng-MAST reveló una gran diversidad en los 20 aislamientos secuenciados debido a que no se encontró ninguna secuencia tipo (ST) predominante. En conclusión, los hallazgos del estudio sirven de línea base para el conocimiento de los aislamientos de N. gonorrhoeae que circulan en nuestro país. La resistencia y la gran variabilidad de las cepas reflejan que enfrentamos un preocupante problema de salud pública, que requiere una estrategia multidisciplinaria que incluya educación, campañas de prevención y promoción, mejora en los métodos diagnósticos y determinación de los perfiles de sensibilidad antimicrobiana.

Abstract. Gonorrhoea is a sexually transmitted infection caused by the bacterium Neisseria gonorrhoeae, this is a serious global public health problem, given increase in antimicrobial resistance. Asymptomatic women, ignorance of the disease, syndromic treatment and sub-register are additional problems to the disease. In Colombia, the National Health Institute (INS, in Spanish) has developed, since 1983, a program for laboratory surveillance of N. gonorrhoea with the voluntary participation of Public Health Laboratories (PHL) at the national level. The present study was conducted with the aim of characterizing phenotypically and genotypically the total number of N. gonorrhoeae isolates, received by the INS from PHL during the time period 2013-2014. The isolates reported during the period of study were received from 19 PHL. For phenotypic typification, assays of antimicrobial susceptibility according to the parameters of the CLSI were performed. Genotypic characterization achieved through techniques such as Electrophoresis Pulsed Field Gel (PFGE), Multi-antigen sequence typing (NG-MAST) and TEM- gene amplification. Out of a total of 246 isolates, we were able to identify the bacteria in 126 (58.53 %) cases. These isolates originated from Bogotá: 62 (25.2 %), Antioquia: 54 (21.9 %), Amazonas: 47 (19.1 %) and Risaralda: 33 (13.4 %). 188 (76.42 %) isolates were from men and 58 (23.57%) from women; 50 (20.33%) of them corresponded to children under 15 years of age and from these, 37 (63.79%) were female. We found 65.8 % resistance to penicillin, 42.8 % to tetracycline, and 29.4% to ciprofloxacin. Multi-resistance occurred in 14 (11.11%) isolates, 13 showed resistance phenotypes, and the most common was penicillinase producing N. gonorrhoeae (PPNG) found in 34 (26.98%) isolates. The PFGE grouped 110 isolates in 17 clusters, with 54 different patterns, while 16 isolates were unrelated. The most common cluster was A with 19 (15.1%) isolates; most of these showed the PPNG resistance phenotype. Ng-MAST (Multi Antigen Sequence Typing) revealed a high genetic diversity in the 20 isolates sequenced as not predominant sequence type was found. In conclusion, our findings serve as baseline for understanding N. gonorrhoeae isolates circulating in Colombia. Resistance and the high variability of strains represent serious public health problem, which requires a multidisciplinary strategy integrating education, prevention campaigns, improved diagnostic methods and determination of antimicrobial susceptibility profiles.