¨Efecto de la vitamina D3 en la producción de resolvina E1 por células mononucleares de sangre periférica de pacientes con periodontitis crónica¨

Abstract

RESUMEN Antecedentes: Las enfermedades periodontales comprenden una amplia gama de afecciones inflamatorias que afectan las estructuras de soporte de los dientes y contribuyen a mantener una inflamación sistémica de baja magnitud (low grade inflammation) (1). Según el IV Estudio Nacional de Salud Bucal- ENSAB IV, la mayor parte de la población (61.8%) presenta periodontitis en sus diferentes grados de severidad (2). Recientes investigaciones han propuesto el uso de mediadores lipídicos pro resolutorios como la Resolvina E1 (RvE1) con el objetivo de devolverle la salud a los tejidos periodontales; estos agonistas de las vías de resolución reducen el número de neutrófilos en el exudado inflamatorio entre otras funciones (17). La vitamina D3 [1,25 (OH) 2D3], regula la homeostasis del calcio y el fosfato en el organismo, y adicionalmente ejerce importantes funciones inmunomoduladoras, favoreciendo así un ambiente adecuado para la resolución del daño (8). Se ha evidenciado que la RvE1 y la vitamina D3 pueden reducir la expresión del factor nuclear kappa B (NF-ΚB), por lo que se ha considerado la opción de investigar sí la vitamina D3 podría incrementar la producción de RvE1 (10)(11). Basados en lo anterior, el objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de la vitamina D3, en la inflamación mediada por la producción de anti inflamatorios naturales en células mononucleares de sangre periférica extraídas de pacientes sistémicamente sanos con y sin enfermedad periodontal. Materiales y Métodos: Se analizaron células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de 8 pacientes adultos voluntarios sistémicamente sanos, entre 30 y 50 años de edad, de los cuales 4 pacientes presentaban periodontitis crónica y 4 eran periodontalmente sanos o con gingivitis. Las CMSP fueron estimuladas por 24 horas con lipopolisacárido (LPS) de Porphyromonas gingivalis, en ausencia y presencia de Vitamina D3. Finalmente se midieron los niveles de resolvina E1 (RvE1) mediante ELISA en el sobrenadante del cultivo. Resultados: Se encontró que las CMSP de pacientes con periodontitis, activadas con LPS de Porphyromonas gingivalis producen mayor cantidad de RvE1 que las células de pacientes periodontalmente sanos, bajo el efecto del mismo activador. Las CMSP de pacientes con periodontitis crónica activadas con LPS en presencia de VD3, mostraron un incremento en la producción de RvE1 al ser comparadas con las células obtenidas de controles sanos activadas bajo iguales condiciones (LPS + VD3). Sin embargo, no hubo diferencias estadísticamente significativas cuando se compararon los niveles de producción de RvE1 por CMSP de pacientes con periodontitis crónica y pacientes sanos activadas solo con VD3. Conclusiones: El LPS de P. gingivalis aumenta significativamente la producción de RvE1 por CMSP, tanto en pacientes sanos como en pacientes con periodontitis crónica. La producción es significativamente mayor en el paciente afectado. La VD3, no aumenta de manera significativa la producción de RvE1 por CMSP, previamente activadas con LPS de P. gingivalis, independientemente del diagnóstico periodontal. A pesar de la ausencia de significancia, se observa una tendencia al aumento de producción de RvE1 en las células activadas con VD3 tanto en presencia como en ausencia del activador. Palabras clave: Resolvina E1, Enfermedad periodontal, Vitamina D3, Inmunomodulación.

Abstract. Periodontitis is a dysbiotic inflammatory disease with an adverse impact on systemic health. The use of resolutive lipid mediators such as Resolvin E1 (RvE1) has been proposed with the aim of restoring health to periodontal tissues through an early resolution of the acute inflammatory process. On the other hand, vitamin D3 (VD3) is responsible for the regulation of calcium homeostasis in the body and also has a role as an immunomodulator. Evidence has shown that it plays an important role in the response against infections. This study evaluated the effect of VD3 on the production of RvE1 by peripheral blood mononuclear cells (CMSP) of patients with chronic periodontitis. The CMSP were stimulated with lipopolysaccharide (LPS) of Porphyromonas gingivalis, in the absence and presence of VD3. We conclude the LPS of P. gingivalis significantly increases the production of RvE1 by PBMC, both in healthy patients and in patients with chronic periodontitis and VD3 does not significantly increase the production of RvE1 by PBMC, previously activated with LPS of P. gingivalis, independently of the periodontal diagnosis. Background: Periodontal diseases comprise a wide range of inflammatory conditions that affect the supporting structures of the teeth and contribute to maintaining a low-grade systemic inflammation (1). According to the IV National Study of Oral Health - ENSAB IV, the majority of the population (61.8%) presents periodontitis in its different degrees of severity (2). Recent researches has proposed the use of resolutive lipid mediators such as Resolvin E1 (RvE1) with the aim of restoring health to periodontal tissues; These agonists of the resolution pathways reduce the number of neutrophils in the inflammatory exudate among other functions (17). Vitamin D3 [1,25 (OH) 2D3], regulates the homeostasis of calcium and phosphate in the body, but exerts important immunomodulatory functions, thus favoring a favorable environment for the resolution of damage (8). It has been shown that RvE1 and vitamin D3 can reduce the expression of nuclear factor kappa B (NF-ΚB), so the option of investigating whether vitamin D3 could increase the production of RvE1 (10) has been considered (11). Based on the above, the objective of this work was to determine the effect of vitamin D3 on inflammation mediated by the production of natural anti-inflammatory in peripheral blood mononuclear cells extracted from systemically healthy patients with and without periodontal disease. Materials and Methods: Peripheral blood mononuclear cells CMSP were analyzed from 8 systemically healthy adult patients, between 30 and 50 years of age, of which 4 patients had chronic periodontitis and 4 were periodontally healthy or with gingivitis. The PBMC were stimulated for 24 hours with LPS of Porphyromonas gingivalis, in the absence and presence of Vitamin D3. Finally, the levels of RvE1 were measured by ELISA in the culture supernatant. Results: We found that the (peripheal blood mononuclear cells) PBMCs of patients with periodontitis, activated with LPS of Porphyromonas gingivalis produce a higher amount of RvE1 in compare with cells of periodontally healthy patients, under the effect of the same activator. The CMSP of patients with chronic periodontitis activated with LPS in the presence of VD3, showed an increase in the production of RvE1 when compared with the cells obtained from healthy controls activated under the same conditions (LPS + VD3). However, there were no statistically significant differences when the production levels of RvE1 were compared by PBMC of patients with chronic periodontitis and healthy patients activated only with VD3. Conclusions: The LPS of P. gingivalis significantly increases the production of RvE1 by PBMC, both in healthy patients and in patients with chronic periodontitis. The production is significantly higher in the affected patient. VD3 does not significantly increase the production of RvE1 by PBMC, previously activated with LPS of P. gingivalis, independently of the periodontal diagnosis. Despite the absence of significance, there is a tendency to increase the production of RvE1 in the cells activated with VD3 both in the presence and absence of the activator. Key words: Resolvin E1, Periodontal disease, Vitamin D3, Immunomodulation.