Aislamiento y purificación de prolactina ¡humana. i-extracción a partir de hipófisis

Abstract

En este trabajo se describen tres métodos para extraer la Proladina Humana (hPRL) a partir de glándulas pituitarias, dentro de un proceso de recuperación global de todas las hormonas adenohipofisiarias. El efecto del sistema de conservación de las glándulas se estudió comparando los resultados obtenidos con glándulas conservadas en acetona o congeladas a -2O0C. Todo el proceso se efectuó a 4eC, tomándose especiales precauciones para evitar la contaminación bacterína y por consiguiente la introducción de pirógenos. Se observó que la recuperación de Prolactina está influenciada tanto por la forma de conservación de las glándulas como por el sistema de extracción del material biológico. Se encontró que las glándulas congeladas dan rendimientos mayores que el polvo de acetona La homogenización de las glándulas en buffer Tris-fosfato permitió una buena recuperación de hormona de crecimiento (hGH), pero dió valores bajos en Prolactina, en cambio al utilizar solución salina (NaCI 0.9%) a pH neutro, se solubilizó la mayor parte de la proteína en tanto que la PRL quedó en el residuo, de donde se extrajo mediante condiciones suaves que no afectaban su estabilidad y dando un rendimiento superior. Del sobrenadante se separaron las fracciones crudas de la hormona de crecimiento y glicoproteínas, las cuales presentaron valores iniciales de potencia que las hacen valiosas como material de partida para extraer y purificarl6ts correspondientes hormonas.