Genotipificación de Mycobacterium tuberculosis en aislados clínicos obtenidos de pacientes Vih positivos de los Hospitales Simón Bolívar y Santa Clara de Bogotá

Abstract

La tuberculosis (TB) es una de las enfermedades infecciosas de más amplia distribución en el mundo y constituye una de las primeras causas de muerte en pacientes con Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA). En Colombia, se ha observado un aumento creciente en el número de casos de pacientes VIH coinfectados con TB, Sindemia que aumenta la gravedad de los dos cuadros, acelerando el deterioro inmunológico y por tanto contribuyendo a la morbilidad y mortalidad de la población coinfectada. Se estudiaron 356 pacientes VIH positivos atendidos en los Hospitales Simón Bolívar y Santa Clara de la ciudad de Bogotá, con el fin de detectar la asociación TB/VIH, de los cuales 36 (10,1%) fueron diagnosticados con TB por cultivo, obteniéndose 49 aislados de Mycobacterium tuberculosis que fueron genotipificados en este estudio, mediante las técnicas de Spoligotyping y MIRU VNTR de 24 loci. El total de los aislados de complejo Mycobacterium tuberculosis (CMT) fueron evaluados por el método fenotípico BACTEC MGITTM SIRETM y el método molecular Genotype® MTBDRplus 2.0 para detectar resistencia a medicamentos antituberculosis. Por el método fenotípico se detectó 1/49 (2%) monorresistencia a rifampicina y 2/49 (4%) monorresistencias a Isoniazida, mientras que, por el método molecular, el 100% de los aislados fueron sensible a Isoniazida y 3/49 (5,9%) monorresistentes a rifampicina. Por Spoligotyping se identificaron en total 15 patrones espoligo, de los cuales 3 fueron huérfanos. Del total de aislados estudiados, 45/49 (91,8%), pertenecen al linaje Euro Americano y de estos el 55% (27/45) pertenecen al sub-linaje Haarlem, 22% (11/45) al sub-linaje LAM y el 14% (7/45) al sub-linaje T. Por la técnica MIRUVNTR, se obtuvo que del total de aislados de M. tuberculosis estudiados, 26/49 (53%) se agruparon 11 clusters y 24/49 (49%) tuvieron patrones únicos. Adicionalmente, se pudo evidenciar infección policlonal en 3 pacientes. De las dos técnicas utilizadas, el poder discriminatorio de MIRU-VNTR (0,984) fue mayor que el del spoligotyping (0,888). Con los resultados obtenidos en este estudio, se genera conocimiento valioso sobre los genotipos de M. tuberculosis circulantes en Bogotá, específicamente en la población VIH/SIDA, que permite entender la dinámica de transmisión de la TB en esta población vulnerable.

Abastract. Tuberculosis (TB) is an infectious disease with a worldwide distribution and is one of the leading causes of death in patients with Acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS). In Colombia, the number of HIV patients co-infected with TB has been increases progressively, this syndemic rises the severity of the two diseases, accelerating the immune deterioration and thus contributing to the morbidity and mortality of the co-infected population. In this study, 356 HIV-positive patients were treated in Simon Bolivar and Santa Clara hospitals of Bogota, in order to determine the TB/HIV partnership. A total of 49 isolates of Mycobacterium tuberculosis were genotyped by spoligotyping and MIRU VNTR loci 24. First line drug susceptibility testing was performed using BACTEC MGITTM SIRETM and Genotype® MTBDRplus 2.0. Susceptibility determination of 49 M. tuberculosis clinical isolates by BACTEC MGITTM SIRETM showed 1/49 (2%) was monoresistance to RIF and 2/49 (4%) were monoresistance to INH. While by Genotype® MTBDRplus 2.0, all isolates were susceptible to INH and 3/49 (5,9%) were monoresistance to RPM. Spoligotype analysis showed 15 patterns, of which 3/49 (6,1%) were orphans and 45/49 (91,8%) belonged to the Euro American lineage. From these patterns, 55% (27/45) belonged to Haarlem sub-lineage, 22% (11/45) to LAM sub-lineage, and 14% (7/45) to T sub-lineage. MIRU-VNTR analysis showed 26/49 (53%) formed 11 clusters and 24/49 (49%) were unique patterns. The discriminatory power of 24- locus MIRU-VNTR typing (0.984) was greater than the Spoligotyping (0.888). The results obtained in this study generates valuable knowledge on the circulating genotypes of M. tuberculosis in Colombia, specifically on HIV-AIDS population. This knowledge is useful for understanding the dynamics of TB transmission in this vulnerable population