Silenciamiento mediado por RNA de genes asociados a patogenicidad y crecimiento en Pseucercospora fijiensis (Mycosphaerella fijensis)
Type
Trabajo de grado - Maestría
Document language
EspañolPublication Date
2017-01-27Metadata
Mostrar registro completoSummary
El uso de secuencias de RNAs de doble cadena (dsRNAs) introducidas en la célula con el objetivo de silenciar la expresión de genes homólogos ha permitido notables avances en el conocimiento de la función génica en diversos organismos. Actualmente en el hongo Peudocercospora fijiensis, agente causal de la sigatoka negra que afecta la producción de plátano y banano, no existen métodos adecuados para evaluar la función génica. En este trabajo se comprobó el silenciamiento transitorio de genes en P. fijiensis mediante la aplicación directa de secuencias de siRNA homologas a los genes Fus3 y CYP51. El gen Fus3 codifica para la enzima MAP quinasas (proteínas quinasas activadas por mitógenos), asociada al crecimiento y virulencia en diversos hongos fitopatógenos (Cousin et al., 2006; Xu, 2000) y el gen CYP51 codifica la enzima citocromo P450 esterol 14α-demetilasa, esencial para la biosíntesis de ergosterol (Canas-Gutierrez et al., 2009; Ma and Tredway, 2013). Los resultados mostraron que las secuencias de siRNA lograron la represión selectiva de estos genes, mediante la inhibición del crecimiento del tubo germinativo y disminución de las cantidades de mRNA. Este estudio sugiere que los genes analizados pueden ser blancos de control en P. fijiensis. Igualmente, el silenciamiento génico mediado por RNA puede ser un método adecuado para la evaluación génica en P. fijiensis que permita dilucidar nuevos blancos de control. Además, el RNA interferente puede ser usado como un mecanismo de control en P. fijiensis, mediante la generación de plantas transgénicas que expresen secuencias de siRNA homólogas a los genes evaluados en este estudio.Summary
Abstract: The use of sequences double-stranded RNAs (dsRNAs), introduced in the cell in order to silence the expression of homologous genes has allowed significant advances in the understanding of gene function in many organisms. Currently, in Peudocercospora fijiensis, causal agent of black sigatoka affecting banana and platano production, there are no adequate methods to assess gene function. In this work, the transient gene silencing in P. fijeinsis was tested by direct application of siRNA homologous to Fus3 and CYP51 genes. Fus3 encode the MAPK protein (Mitogen-activated protein kinase), associated to growth and virulence in various phytopathogenic fungi (Xu, 2000) and CYP51 encodes the enzyme sterol 14α-demethylase, essential in ergosterol biosynthesis. (Canas-Gutierrez et al., 2009; Ma and Tredway, 2013). The results show that siRNA achieved the selective repression of these genes, by inhibition of germ tube growth and decreasing levels of mRNA. This study suggests that the analyzed genes may being targets of control in P. fijeinsis. Similarly, gene silencing by RNA may be a suitable method for evaluating gene in P. fijeinsis allowing elucidate new targets for control. In addition, RNA interference can be used as a control mechanism in P. fijeinsis, by generating transgenic plants expressing siRNA sequences homologous to the genes evaluated in this study.Keywords
Collections
![Atribución-NoComercial 4.0 Internacional](/themes/Mirage2//images/creativecommons/cc-generic.png)