Generación y evaluación de la sobreexpresión del intercambiador putativo LbClC-A en una cepa de Leishmania spp

Abstract

Las Leishmaniosis, consideradas un problema de salud pública, son enfermedades transmitidas por vectores, y tienen un amplio rango de presentaciones clínicas. Su agente etiológico son parásitos del género Leishmania. Dentro de su ciclo de vida, Leishmania spp. está expuesto a fluctuaciones en el ambiente entre el intestino del insecto vector y las células mononucleadas del hospedero mamífero, que ha llevado a que desarrolle mecanismos que le permitan sobrevivir a estos cambios. El objetivo de este trabajo fue estudiar el impacto de la sobrexpresión de LbClC-A en el ciclo de vida del parásito. Para esto se generó una cepa de Leishmania transfectada con un plásmido que contiene la secuencia completa del gen LbClC-A y se evaluaron su morfología, crecimiento in vitro y capacidad de infección de una línea celular de macrófagos. Los resultados evidencian disminución en la tasa de crecimiento, cambio en la morfología y baja tasa de infectividad, al igual que alteración de la respuesta de decremento regulado de volumen desencadenada por un reto hipoosmolar en la cepa transfectada con respecto al control.

Abstract: Leishmaniasis considered a public health problem, are diseases transmitted by vectors with a wide range of clinical presentations. Their etiologic agents are parasites of the Leishmania genus. Within its life cycle, Leishmania spp. is exposed to environmental fluctuations between the intestine of the insect vector and the mononuclear cells of the mammalian host. Therefore, this parasite has developed mechanisms to survive these changes. The objective of this work was to study the impact of the overexpression of LbClC-A in the in vitro life cycle of the parasite. For this, a strain of Leishmania was transfected with a plasmid containing the complete sequence of the gene LbClC-A and its morphology, in vitro growth and ability to infect a macrophage cell line were evaluated. The results show a decrease in the growth rate, changes in the morphology of the parasite and low infectivity rate, as well as alteration of the regulated volume decrement response triggered by a hypo-osmolar challenge in the transfected parasites compared to controls.