Fitoalexinas en lima Tahití (Citrus latifolia): evaluación de la composición, actividad antifúngica e inducción mediante elicitores

Abstract

El presente trabajo describe el aislamiento de seis cumarinas a partir de frutos de lima Tahiti (Citrus latifolia Tanaka): 5-geranoxi-7-metoxicumarina (I), 5,7-dimetoxicumarina (sin. Citroptene, II), 5,8-dimetoxipsoraleno (III), 5-metoxipsoraleno (sin. Bergapteno, IV), 5-geranoxipsoraleno (V) y 5-(2,3-dihidroxi-3-metilbutoxy)psoraleno (VI). Estos compuestos se purificaron usando técnicas cromatográficas estándar y se identificaron por métodos espectroscópicos (1H y 13C RMN 1D y 2D, IR y UV). Posteriormente, se evaluó la actividad antifúngica (inhibición del crecimiento micelial y germinación de esporas) de las cumarinas contra el hongo causante de la antracnosis, Colletotrichum spp. (aislado de partes aéreas de lima Tahiti). Algunas cumarinas y mezclas de ellas, tales como citroptene y bergapteno, mostraron un efecto inhibitorio significativo (crecimiento radial y germinación de esporas) en comparación con el control. Finalmente, se desarrolló un método por cromatografía líquida (HPLC) para detectar y cuantificar las cumarinas, y estudiar el efecto de algunos elicitores reconocidos para inducir su producción en frutos de C. latifolia Tanaka. Los resultados mostraron que los perfiles cromatográficos son dependientes del elicitor aplicado. Como resultado de la inducción, se presentó un aumento significativo en la cantidad de algunas cumarinas, en comparación con los controles. En conclusión, las cumarinas aisladas podrían estar involucradas en los mecanismos de defensa de C. latifolia Tanaka y su acumulación puede ser modulada mediante la aplicación de elicitores.

Abstract: The present work describes the isolation of six coumarins from fruits of Tahiti lime (Citrus latifolia Tanaka): 5-geranoxy-7-methoxycoumarin (I), 5,7-dimethoxycoumarin (syn. Citroptene, II), 5,8 -dimethoxypsoralen (III), 5-methoxypsoralen (syn. Bergaptene, IV), 5- geranoxipsoralen (V) and 5- (2,3-dihydroxy-3-methylbutoxy)psoralen (VI). These compounds were purified using standard chromatographic techniques and identified by spectroscopic methods (1H and 13C NMR 1D and 2D, IR and UV). Subsequently, the antifungal activity (inhibition of mycelial growth and germination of spores) of the coumarins against the fungus causing the anthracnose, Colletotrichum spp. (isolated from aerial parts of lima Tahiti). Some coumarins and mixtures thereof, such as citroptene and bergaptene, showed a significant inhibitory effect (radial growth and spore germination) compared to the control. Finally, a method was developed by liquid chromatography (HPLC) to detect and quantify coumarins, and study the effect of some recognized elicitors to induce their production in fruits of C. latifolia Tanaka. The results showed that the chromatographic profiles are dependent on the applied elicitor. As a result of the induction, there was a significant increase in the amount of some coumarins, compared to the controls. In conclusion, isolated coumarins could be involved in the defense mechanisms of C. latifolia Tanaka and their accumulation can be modulated by the application of elicitors.