Avances en la propagación in vitro de agraz (Vaccinium meridionale Swartz)

Abstract

El agraz (Vaccinium meridionale Swartz) es de interés por su similaridad con el arándano y por sus propiedades nutraceúticas. En los últimos años se desarrollaron métodos de propagación para esta especie, que permiten superar la dificultad en la obtención de material vegetal de siembra. Sin embargo, la introducción in vitro de micro-estacas de agraz provenientes de campo presenta limitantes, como oxidación y contaminación. Para lograr controlar estas limitantes se realizaron cinco series de experimentos que permitieron establecer las condiciones de desinfección e introducción in vitro de microestacas de agraz. Se evaluaron varias fuentes de material vegetal, métodos de desinfección y composiciones de medios de cultivo. Se logró obtener porcentajes de brotación superiores al 60% cuando se utilizó suplementación de 1 o 2 mg*L-1 de kinetina; 0,5mg*L-1 de kinetina y 1mg*L-1 de ácido naftanelacético y 2 mg*L-1 de 2-isopentiladenina en medio de introducción, utilizando brotes maduros, coincidiendo con bajos niveles de oxidación. Además, se logró inducir organogénesis directa sobre medio básico suplementado con L-cisteina (200mg*L-1) y tidihazuron (0-4 mg*L-1) a partir de hipocotilos y hojas cotiledonares. En hipocótilos se observó la formación de yemas y brotes adventicios, en concentraciones de tidihazuron superiores a 1 mg*L-1 los brotes y yemas presentaron deformaciones. En hojas cotiledonales se desarrollaron yemas adventicias. La mayor inducción de yemas se observó al usar entre 0,5 a 2 mg*L-1 de tidihazuron en medio básico. El número de yemas y brotes fue directamente proporcional a la concentración de tidihazuron y La calidad de las yemas disminuyó a medida que aumentó su concentración. En esta investigación se logró exitosamente la introducción y multiplicación in vitro de agraz empleando brotes maduros, en medio de introducción suplementado con kinetina (1-2 mg*L-1) o 2-isopentiladenina (2 mg*L-1), la germinación in vitro de plántulas de agraz en medio básico en doble fase suplementado con L-cisteina (200 mg*L-1), y la multiplicación por organogénesis directa al usar hojas cotiledonares e hipocótilos cultivados sobre medio básico suplementado con L-cisteina (200 mg*L-1) y tidihazuron (0,01-2 mg*L-1), lo que contribuye a resolver los limitantes en la producción de material vegetal y el cultivo in vitro para esta especie. Palabras clave: Contaminación in vitro; oxidación in vitro; inducción de brotación axilar; inducción de organogénesis directa; germinación in vitro. (Texto tomado de la fuente).

The Andean blueberry (Vaccinium meridionale Swartz) is of interest due to its similarity to blueberry and its nutraceutical properties. In recent years many propagation methods have been developed for this species, that allow to overcome the difficulty for obtaining vegetal propagation material. Nevertheles, the in vitro introduction of field micro-cuttings presents strong difficulties, such as, oxidation and contamination. Five experimental series were carried out to establish the conditions of disinfection and introduction in vitro of Andean blueberry hard cutting. We evaluated several sources of plant material, disinfection methods and compositions of culture media. It was possible to obtain percentages of 60% and superiors the bud break and axillar shoots, when used supplementation with kinetin (1-2 mg*L-1); kinetin (0,5mg*L-1) and naphthaleneacetic acid (1 mg*L-1) or N6-(2-Isopentenyl) adenine (2 mg*L-1) in culture media of introduction, employed matured shoots and this coincide with low level of oxidation. . In view of the observed difficulty on micropropagation of Andean blueberry by micro-cuttings, a process of direct organogenesis induction with tidihazuron (0-4 mg*L-1), it was developed on basic medium supplemented with L-cysteine (200 mg*L-1), from hypocotyls and seed leaves. In hypocotyls, we observed the formation of adventitious bud and adventitious shoots, at tidihazuron concentrations above 1 mg*L-1, the bud and shoot presented deformations. In seed leaves, adventitious buds were developed. The largest bud formation was observed when we used between 0,5 to 2,0 mg*L-1 of tidihazuron. The number of buds and shoots was directly proportional to the concentrations of tidihazuron and the quality of the sprouts decreased with increase of the concentration of tidihazuron. In this research was accomplished successfully the in vitro introduction and multiplication of Andean blueberry using mature shoots, in introduction medium supplemented with kinetin (1-2 mg*L-1) or N6-(2-Isopentenyl) adenine (2 mg*L-1), in vitro germination of seedling of Andean blueberry in basic medium in dual phase, supplemented with L-cysteine (200 mg*L-1), and the multiplication for direct organogenesis in seed leaves and hypocotyls in introduction medium supplemented with tidhiazuron (0,01-2mg*L-1). These results help to solve the limiting factors in the production of plant material and the in vitro culture for this species. Keywords: in vitro contamination; in vitro oxidation; in vitro regeneration; induced axillary sprouting; induced direct regeneration; in vitro germination.