Caracterización morfológica de células mediante microscopía holográfica digital en transmisión fuera de eje

Abstract

La Microscopia Holográfica Digital en transmisión (MHD) es considerada una herramienta útil en la caracterización no-invasiva de objetos biológicos translúcidos. En la presente tesis se propone esta técnica para el estudio de macrófagos de ratón de la línea J774.A1 control o infectados por Leishmania. La MHD inicia con el registro óptico de los hologramas utilizando un interferómetro Mach-Zehnder modificado, y posteriormente con la reconstrucción numérica del campo óptico complejo se calcula su amplitud, la que permite la caracterización morfométrica de las muestras y su mapa de diferencia de fase, con el que es posible acceder al cálculo de las variaciones internas de índice integral de refracción relativo, con esto se estima el nivel de infección de las muestras estudiadas. Por medio de la descripción de las variaciones morfométricas y del índice integral de refracción, se describe cuantitativamente la evolución temporal de la infección, lo que permite proponer a la MHD como una posible herramienta de diagnóstico para estos objetos biológicos en presencia de algún patógeno.

Abstract: The Digital Holographic Microscopy in Transmission (DHM) is considered a useful tool in the non-invasive caracterization of translucent biological objects. In this thesis, we propose this technique to study the macrophages of mouse line J774.A1 control or infected by Leishmania. The MHD begins with the optical register of holograms using a modified Mach-Zender interferometer, and subsequent rebuilding the complex numerical optical field, we calculate his amplitude, It allows morphological characterization of the samples and his phase differences maps, with this result is possible access to calculate of the internal variations for the relative integral refraction index, with this process, we estimate the infection level of the samples studied. Through the description of morphological changes and the integral refraction index is possible to describe quantitative the temporal evolution of the infection. It procedure converts to the MHD in a viable support tool for diagnosis for these biological objects under the presence of some pathogen.