Variabilidad molecular y taxonomia de larvas de moscas de la fruta anastrepha spp. (diptera: tephritidae) asociadas a tres frutales en tres zonas de vida en Antioquia

Abstract

El Código de barras de ADN es una técnica que se basa en el análisis de distancias genéticas para identificar especies utilizando generalmente un segmento del gen Citocromo C Oxidasa I (COX1). Por ello, el presente estudio determinó la variabilidad molecular y taxonómica de larvas y adultos de algunas especies Colombianas de moscas de la fruta Anastrepha spp (Diptera: Tephritidae), asociadas a tres frutales, en tres zonas de vida, en el Departamento de Antioquia. Se identificaron morfológicamente en este estudio y verificadas por el especialista tres especies en cada uno de los frutales muestreados A. fraterculus en Guayaba feijoa (f. sellowiana L), A. striata en Guayaba común (P. guajaba L.) y A. obliqua en Mango (Manguifera indica L), Se destinaron 44 individuos de tres especies de larvas colectadas en frutos y adultos que completaron su ciclo de vida en el laboratorio de Biología y sistemática de Insectos, se realizó un montaje de sus estructuras diagnosticas en placas fijas con Euparal y se dejaron como voucher en el Museo Entomológico Francisco Luis Gallego de la Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín Las 44 secuencias de nucleótidos obtenidas de las larvas y adultos de las tres especies fueron comparadas con las bases de datos de Gen Bank y Bold Systems. La identificación con base en morfología-molecular coincidió en un 100%. Se realizó un análisis de distancia genética mediante Neighbor Joining donde el dendrograma con secuencias obtenidas de las bases de datos para las especies muestreadas de larvas y adultos mostró tres grupos altamente diferenciados con valores de 98% de similitud para A. fraterculus, y A. obliqua y 100% en A. striata. Se encontraron 23 haplotipos donde se combinaron larvas y adultos en los haplotipos idénticos uno, dos, tres, seis y 21 de cada una de las tres especies con distancias genéticas intraespecificas entre 0.6 y 1.3 mientras que el valor promedio interespecifico fue superior a 7.9, por lo cual se comprobo que existe un barcoding gap pues los valores inter e intra no se solapan. Y entre los tres grupos se encuentra un valor de diferencia de 2.15% de divergencia genética. Todo esto constituye un avance importante en la validación de la metodología barcode para la identificación de moscas de la fruta en estado de larva y adulto en relación con normas de cuarentena que involucran este insecto plaga. Palabras claves: ADN, Codigo de barras, Tephritidae, Anastrepha.

Abstract: The DNA Barcode is a technique that relies on the analysis of genetic distances to identify species using a segment of the Cytochrome C Oxidase I (COX1) gene. Therefore, the present study determined the molecular and taxonomic variability of larvae and adults of some Colombian species of Anastrepha spp (Diptera: Tephritidae) fruit flies, associated to three fruit trees, in three areas of life, in the Department of Antioquia. Three species were identified morphologically in this study and verificated by the specialist in each of the fruit trees sampled in A. fraterculus in Guava feijoa (feijoa sellowiana L), A. striata in Guava common (Psidium guajava L.) and A. obliqua in Mango (Mangifera indica L), 44 individuals of three species of larvae collected in fruits and adults that completed their life cycle in the laboratory of Insect Biology and Systematics were assigned, their diagnostic structures were assembled on fixed plates with Euparal and left as Voucher in the Entomological Museum Francisco Luis Gallego of the National University of Colombia Headquarters Medellín. The 44 nucleotide sequences obtained from the larvae and adults of the three species were compared with Gen Bank and Bold Systems databases. Identification based on molecular morphology coincided 100%. A genetic distance analysis was performed by Neighbor Joining where the dendrogram with sequences obtained from the databases for the sampled species of larvae and adults showed three highly differentiated groups with 98% similarity values for A. fraterculus and A. obliqua and 100% in A. striata. Twenty-three haplotypes were found where larvae and adults were combined in the identical haplotypes one, two, three, six and 21 of each of the three species with intraspecific genetic distances between 0.6 and 1.3, while the interspecific average value was higher than 7.9, which is verified that there is a barcoding gap because the inter and intra values do not overlap. And among the three groups is a difference value of 2.15% of genetic divergence. All this constitutes an important advance in the validation of the barcode methodology for the identification of fruit flies in larva and adult state in relation to quarantine rules that involve this plague insect. Keywords: DNA, Barcode, Tephritidae, Anastrepha,