Análisis de la mutación BRAF V600E en una serie de pacientes con Histiocitosis de Células de Langerhans del Hospital de la Misericordia

Abstract

La Histiocitosis de células de Langerhans (HCL) es una enfermedad de comportamiento clínico variable y etiopatogenia desconocida. Desde 2010 se ha informado que 38-64% de todos los casos de HCL albergan la mutación activadora BRAFV600E, pero su significado clínico es incierto; por tanto, se buscó caracterizar las variables demográficas y clínicas de una serie de niños con diagnóstico de HCL para hacer una correlación con la presencia de esta mutación. Esto se hizo por medio de Inmunohistoquímica con el Anticuerpo VE1 usando una escala semicuantitativa y Secuenciación de Sanger en pacientes con diagnostico confirmado de HCL. Se analizaron un total de 50 pacientes (edad promedio: 41 meses), 48% con HCL monosistémica (n:24), 12% con HCL multisistémica sin compromiso de órgano de riesgo (n:6) y 40% con HCL con compromiso de órgano de riesgo (n:20). Con el Anticuerpo VE1 se obtuvo positividad para BRAF V600E en 54% de los casos; 34 de las 50 muestras fueron llevadas a análisis molecular por Secuenciación, y se encontró concordancia de 90,3% entre los dos métodos utilizados para evaluar la mutación. Tanto en el estudio de Inmunohistoquímica como en el de secuenciación, se encontró una diferencia estadísticamente significativa de BRAFV600E con la edad de presentación (2años vs 2 años) (p= 0,021 y p=0.011 respectivamente); no hubo correlación estadísticamente significativa con tipo de HCL o con presencia de secuelas, riesgo de recaída o mortalidad. Las muestras con tinción débil por Inmunohistoquímica para BRAFV600E (1+) requieren confirmación por medio de un método molecular.

Abstract: Langerhans cell histiocytosis (LCH) is a disease of variable clinical behavior and unknown pathogenesis. Since 2010 it has been reported that 38-64% of all cases of HCL harbor the BRAFV600E activating mutation, but its clinical significance is uncertain; therefore, we sought to characterize the demographic and clinical variables of a series of children diagnosed with HCL to make a correlation with the presence of this mutation. This was done through Immunohistochemistry with the VE1 Antibody using a semiquantitative scale and Sanger Sequencing in patients with a confirmed diagnosis of HCL. A total of 50 patients were analyzed (average age: 41 months), 48% monosystemic LCH (n: 24), 12% multisystemic LCH without risk organ involvement (n: 6) and 40% LCH with risk organ involvement (n: 20). With the VE1 Antibody, positivity was obtained for BRAF V600E in 54% of the cases; 34 of the 50 samples were taken to molecular analysis by sequencing, and 90.3% concordance was found between the two methods used to evaluate the mutation. Both in the Immunohistochemical study and in the sequencing study, a statistically significant difference of BRAFV600E was found with the age of presentation (2 years vs 2 years) (p = 0.021 and p = 0.011 respectively); there was no statistically significant correlation with type of LCH or with the presence of sequelae, risk of relapse or mortality. Samples with weak staining by Immunohistochemistry for BRAFV600E (1+) require confirmation by means of a molecular method.