Diseño, síntesis y evaluación “in vitro” de análogos de péptidos antimicrobianos con potencial actividad como compuestos antituberculosos

Abstract

En este estudio, se utilizaron herramientas de la bioinformática para diseñar in silico secuencias análogas de los péptidos antimicrobianos LL37, Bombinina, Protamina, Dermacidina 1L, Maximina 1, CAP 18, SMAP 29, PMAP 36 y Cecropina B, mostrando mejor estructura helicoidal y actividad antibacteriana en comparación con las secuencias nativas derivadas (péptidos de 15 residuos, denominados A). Los péptidos derivados y análogos (denominados B) se sintetizaron usando la estrategia de Fmoc, se purificaron por RP-HPLC y se caracterizaron por MALDI-TOF y dicroísmo circular. El ensayo in vitro de la viabilidad de las células de M. smegmatis mc2155, el péptido análogo de CAP 18-B muestra una concentración mínima inhibitoria 10 veces menor al péptido CAP 18-A. Los péptidos diseñados mostraron hemólisis menor al 10% e inhibición significativa de la actividad de la ATPasa basal. Los resultados obtenidos sugieren que los péptidos diseñados pueden interferir con la viabilidad de micobacterias y tienen potencial aplicación antituberculosa.

Abstract. In this study, the “in silico” design with bioinformatics tools of analogous sequences of the antimicrobial peptides LL37, Bombinin, Protamine, Dermacidin 1L, Maximin 1, CAP 18, SMAP 29, PMAP 36 and Cecropin B, displayed improved helical structure and antibacterial activity in comparison with derived native sequences derived. Analogues and derived peptides were synthesized using Fmoc strategy, purified by RP-HPLC and characterized by MALDI-TOF and circular dichroism. The in vitro cell viability assay of M. smegmatis mc2155, an analogous peptide CAP 18-B displayed a minimal inhibitory concentration 10-fold lower that the showed for the native peptide. In addition, the designed analogous peptides showed human erythrocytes hemolysis lesser than 10% and significant inhibition of the basal ATPase activity of mycobacterial plasma membrane vesicles, the results obtained suggest that the designed peptides can interfere with the mycobacterial viability and have potential antituberculous application.