Efecto de scaffold de fibrina y suplementos séricos, sobre la proliferación de células madre mesenquimales y su diferenciación a osteoblastos in vitro

Vista sencilla de ítem
dc.contributor.advisorVásquez Araque, Neil Aldrin
dc.contributor.advisorAlfonso García, Sandra Liliana
dc.contributor.authorCataño Torres, Isabel Cristina
dc.contributor.orcidmailto:https://orcid.org/0009-0004-0857-4698spa
dc.contributor.researchgroupBiotecnología Animal y Crecimiento y Desarrollo Craneofacialspa
dc.date.accessioned2025-06-25T14:05:31Z
dc.date.available2025-06-25T14:05:31Z
dc.date.issued2024
dc.description.abstractResumen Objetivo Evaluar el cultivo en el scaffold de fibrina (S-FBR) y con los suplementos séricos de plasma rico en factores de crecimiento (PRGF) y suero fetal bovino (SFB), sobre la proliferación de células madre mesenquimales de cordón umbilical humano (hUCMSC) y su potencial de diferenciación a osteoblastos. Materiales y métodos: para evaluar el efecto del S-FBR sobre la cinética de proliferación de una línea celular de hUCMSC, con el sangrado periférico de 3 voluntarios masculinos sanos entre 20 -30 años, obteniendo el S-FBR con un protocolo de centrifugado determinado (primera centrifugación a 450 xg por 5 minutos, se sustrajo el plasma inmediatamente por encima de la capa del buffy coat y debajo del plasma pobre en plaquetas; con este plasma se realiza un segundo centrifugado a 1400 xg por 5 minutos, al plasma resultante se le adicionó cloruro de calcio (CaCl₂) a 50 mM según volumen del pozo) y adicionando el suplemento de PRGF 10% (obtenido con la muestra sanguínea de los donantes, centrifugando inicialmente a 580xg por 10 min, se sustrajo el plasma de los 3 voluntarios y se hizo un pool de PRP, que se centrifugó nuevamente a 1400 xg, 10 min. se le agregó gluconato de calcio (0,5 ml/10ml de PRP) según volumen del pozo y luego se le realizaron 4 ciclos de congelamiento y descongelamiento de 37°C a -20 °C para generar lisis plaquetaria, agregando al medio (DMEM) una concentración de PRGF 10%) y suplemento de FBS 10%. Se generaron 5 grupos de estudio 1. S-FBR+ PRGF. 2. S-FBR + FBS. 3. S-FBR. 4. PRGF 10% y 5. FBS 10%. En cada uno de ellos se sembró por pozo 10.000 hUCMSC caracterizadas. Se evaluó inicialmente, por grupo experimental la proliferación, nivel de duplicación y tiempo de generación, a las 24h y 48h con MTT (absorbancia de 570nm). Luego en los 5 grupos de estudio, se observó la diferenciación de las hUCMSC a osteoblastos por 21 días, identificando los centros de calcificación temprana con tinción de alizarina roja, Von Kossa, SEM (scanning electron microscope) y su composición por EDS (energy-dispersive X-ray spectroscopy). Resultados: El porcentaje de proliferación de la hUCMSC de mayor a menor valor en los grupos de estudio a las 24 h. fue: S-FBR (363,6 % ± 48,19), S-FBR + FBS (261,64% ± 83,10), PRFG (190,5 % ± 14,5), S-FBR + PRGF (177,93% ± 46,93) y FBS (92,82% ± 14,46); no se presentó diferencia estadística significativa entre los grupos S-FBR + PRGF vs. PRGF, entre los demás sí la hubo (P < 0,05). El porcentaje de proliferación a las 48 h. fue: S-FBR (494,46 % ± 88,38), S-FBR + FBS (349,27% ± 112,34), PRGF (261,97% ± 24,28), FBS (178,61% ± 37,04) y S-FBR + PRGF (137,07% ± 82,03), no se presentó diferencia estadística significativa entre los grupos S-FBR + PRGF vs. FBS y S-FBR + FBS vs. PRGF, entre los demás si la hubo. El grupo S-FBR tuvo el mejor nivel de duplicación, a las 24h (2,21 ± 0,15), con diferencia estadística significativa vs. los demás grupos de estudio, y a las 48 h. (2,48 ± 0,41), no presentó diferencia significativa con el grupo S-FBR + FBS (P > 0,05). En cuanto al tiempo de generación, el grupo S-FBR tuvo los menores tiempos de generación, a las 24h.:10,91 ± 0,80 con diferencia estadística significativa comparado con los demás grupos, y a las 48 h. 20,10 ± 5,15, tiempo en el que no se dio diferencia significativa con el grupo S-FBR + FBS, con los demás grupos experimentales si hubo (P >0,05). Se confirmaron centros de osificación por tinción de alizarina roja y Von Kossa además por SEM y EDS en los grupos S-FBR, S-FBR + FBS y S-FBS + PRGF. Conclusiones: el S-FBR tiene un mejor efecto sobre la proliferación de células madre mesenquimales y sostiene su estímulo hasta los 21 días durante el periodo de diferenciación a osteoblastos. El S-FBR + PRGF y S-FBR + FBS también lograron un buen estímulo sobre la cinética celular. (texto tomado de la fuente)spa
dc.description.abstractObjective: To evaluate the effect of culture in fibrin scaffold (S-FBR) and with serum supplements of plasma rich in growth factors (PRGF) and fetal bovine serum (FBS) on the proliferation of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSC) and their differentiation potential into osteoblasts. Materials and methods: to evaluate the effect of S-FBR on the proliferation kinetics of a hUCMSC cell line, with peripheral bleeding from 3 healthy male volunteers between 20 -30 years old, obtaining the S-FBR with a specific centrifugation protocol (first centrifugation at 450 xg for 5 minutes, the plasma was removed immediately above the buffy coat layer and below the platelet-poor plasma; with this plasma a second centrifugation was performed at 1400 xg for 5 minutes, to the resulting plasma calcium chloride (CaCl₂) was added at 50 mM according to the volume of the well) and adding the PRGF 10% supplement (obtained from the blood sample of the donors, initially centrifuged at 580xg for 10 min, the plasma was removed from the 3 volunteers and a PRP pool was made, which was centrifuged again at 1400 xg, 10 min. calcium gluconate (0.5 ml/10 ml of PRP) depending on the volume of the well and then 4 cycles of freezing and thawing were performed from 37 ° C to -20 ° C to generate platelet lysis, adding a concentration of 10% PRGF to the medium (DMEM) and a 10% FBS supplement. 5 study groups were generated: 1. S-FBR + PRGF. 2. S-FBR + FBS. 3. S-FBR. 4. SCLP 10% and 5. FBS 10%. In each of them, 10,000 characterized hUCMSCs were seeded per well. Proliferation, duplication level and generation time were initially evaluated per experimental group at 24h and 48h with MTT (absorbance of 570nm). Then, in the 5 study groups, the differentiation of hUCMSCs into osteoblasts will be observed for 21 days, identifying the early calcification centers with alizarin red staining, Von Kossa, SEM (scanning electron microscope) and their composition by EDS (energy dispersive X-ray spectroscopy). Results: The percentage of hUCMSC proliferation from highest to lowest value in the study groups at 24 h was: S-FBR (363.6% ± 48.19), S-FBR + FBS (261.64% ± 83.10), PRFG (190.5% ± 14.5), S-FBR + PRGF (177.93% ± 46.93) and FBS (92.82% ± 14.46); there was no significant statistical difference between the S-FBR + PRGF vs. PRGF groups, but there was a significant difference among the other groups (P < 0.05). The percentage of proliferation at 48 h. was: S-FBR (494.46% ± 88.38), S-FBR + FBS (349.27% ± 112.34), PRGF (261.97% ± 24.28), FBS (178.61% ± 37.04) and S-FBR + PRGF (137.07% ± 82.03), there was no significant statistical difference between the S-FBR + PRGF vs. FBS and S-FBR + FBS vs. PRGF groups, among the others there was. The S-FBR group had the best level of duplication, at 24h (2.21 ± 0.15), with a significant statistical difference vs. the other study groups, and at 48h. (2.48 ± 0.41), did not present significant differences with the S-FBR + FBS group (P > 0.05). Regarding the generation time, the S-FBR group had the lowest generation times, at 24h: 10.91 ± 0.80 with a significant statistical difference compared to the other groups, and at 48h. 20.10 ± 5.15, a time in which there was no significant difference with the S-FBR + FBS group, with the other experimental groups there was (P > 0.05). Ossification centers were confirmed by alizarin red and Von Kossa staining, as well as by SEM and EDS in the S-FBR, S-FBR + FBS and S-FBS + PRGF groups. Conclusions: S-FBR has a better effect on the proliferation of mesenchymal stem cells and maintains its stimulation up to 21 days during the differentiation period to osteoblasts. S-FBR + PRGF and S-FBR + FBS also achieved good stimulation of cell kinetics.eng
dc.description.curricularareaÁrea curricular Biotecnologíaspa
dc.description.degreelevelMaestríaspa
dc.description.degreenameMagister en Ciencia - Biotecnologíaspa
dc.description.methodsConsideraciones éticas. El proyecto es avalado por el comité de ética de la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional de Colombia en el Acta 15-23, octubre 17 de 2023. La realización de la investigación se adecuó a las recomendaciones para investigación biomédica de la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial de 2008, la Declaración Universal sobre Bioética y Derechos humanos (2006), las guías y Pautas éticas internacionales para la investigación relacionada con la salud con seres humanos, del Consejo de Organizaciones Internacionales de las Ciencias Médicas CIOMS en colaboración con la Organización Mundial de la Salud-OMS (2016), las normas científicas, técnicas y administrativas para la investigación en salud en la Resolución No. 008430 de 1993 específicamente en su Capítulo I: De los aspectos éticos de la investigación en seres humanos (Ministerio de Salud de Colombia, Resolución 8430 de 1993), y las normas de buenas prácticas de laboratorios (BPL) de la OMS (2010). Los procedimientos de la investigación fueron efectuados por personas calificadas y competentes en el campo clínico y científico. La responsabilidad del estudio en primera instancia radica en el investigador principal, quien cuenta con los conocimientos y las competencias necesarias para hacerlo viable. En segunda instancia, al ser individuos que participan de forma voluntaria, la responsabilidad recae en el compromiso del docente y la estudiante de la Maestría en Biotecnología, quien se encargó del acompañamiento del donante durante la toma de muestra de sangre, así como del procesamiento y análisis de las muestras durante el periodo de la investigación. En la consulta inicial la investigadora principal informó a los participantes sobre el estudio y sus objetivos, apoyada en un folleto informativo (anexo 1), se les preguntó si deseaban participar voluntariamente para proceder a leer el consentimiento informado, se les preguntó además si lo entendieron, y se les resolvió las inquietudes que surgieron durante su lectura. Los participantes estuvieron de acuerdo con las condiciones planteadas, y se procedió a su firma (anexo 2). La información recopilada en esta investigación es confidencial, a cada participante se le asignó un código y sus datos son anónimos, la información personal, así como los datos recolectados están bajo custodia de los investigadores. La toma de muestra de sangre periférica es un procedimiento común el cual representa un riesgo mínimo (Ministerio de Salud de Colombia, Resolución 8430 de 1993) y es manejado bajo las normas de bioseguridad establecidas por la seccional de salud de Antioquia y por las autoridades locales y Nacionales. Los riesgos potenciales de la toma de muestra de sangre periférica pudieron ser generales, tales como mareo leve y específicos, como la extravasación, edema, flebitis, dolor, hematoma transitorio en la zona de la punción, por lo tanto, las probabilidades de haber afectado al participante no son significativas. Adicionalmente, se tuvo en cuenta su historia clínica en relación con su estado físico actual y antecedentes personales y familiares previos a la toma de la muestra. El individuo que participó en esta investigación no se benefició directamente, pero más adelante la poblacional en general se puede beneficiar con esta investigación, que propone el desarrollo de procedimientos y métodos encaminados en la regeneración tisular ósea, específicamente la regeneración ósea periodontal. De esta forma se beneficiarán individuos con afecciones de los tejidos óseos bucales y se podrá contar con una alternativa de tratamiento diferente a la actualmente brindada. La empresa Exosomas S.A.S (NIT 901269822-1) proveyó las hUCMSC utilizadas en este proyecto, las cuales fueron obtenidas a partir de madres sanas clínicamente durante toda su gravidez y a término completo, que firmaron un consentimiento de donación libre y voluntario que se ciñó a los avales éticos respectivos que demanda esta actividad (anexo 3). La empresa declara no tener conflicto de intereses. La Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín cuenta con un protocolo de bioseguridad para los desechos generados en el procesamiento de este tipo de muestras. El protocolo implementado por la Dirección Nacional de Laboratorios siguiendo lo establecido por el estatuto metropolitano del medio ambiente del Valle de Aburrá, en el Acuerdo 007 de mayo 17 de 1993 del Concejo de Medellín; el Código sanitario nacional, en la Ley 9 de 1979; el Estatuto de seguridad industrial, en la Resolución 2.400 de 1979; y demás normas y recomendaciones internacionales que regulan la materia. Además, en el laboratorio de genética se cuenta con la implementación de las regulaciones para la recolección, almacenamiento y transporte biológico tanto del material obtenido como del procesado por medio de la Resolución Número 01164 de 2002 (Ministerio del Medio Ambiente). Obtención de muestra sanguínea Se seleccionaron 3 varones sanos, con edad entre 20 y 30 años, por tener un alto nivel de hematocrito que genera mayor concentración de citoquinas (factores de crecimiento) a diferencia de mujeres y personas a partir de los 59 años, lo cual se refleja en una alta capacidad de regeneración y en las características fisicoquímicas del scaffold (longitud, densidad fibrilar y porosidad) además de tenerse en cuenta el componente genético, hormonal y aspectos ambientales que también pueden influir (Bai et al., 2018; Miron et al., 2019; Mamajiwala et al., 2020; Saluja et al., 2011), sin antecedentes de consumo de anticoagulantes, terapia de medicación antiplaquetaria, desórdenes sanguíneos, desórdenes metabólicos, terapia antirresortiva, procesos infecciosos o inflamatorios. Se colectaron 30 ml sangre venosa periférica de cada voluntario empleando dos tipos de anticoagulantes citrato de sodio al 3.2% (SD) y ácido cítrico-dextrosa (ACD-A) (Andrade et al., 2022; Anitua et al., 2020). Obtención de coágulo (scaffold) de fibrina: S-FBR El scaffold de fibrina (S-FBR) se obtuvo de cada paciente. Se colectó la sangre en tubos de 4 ml con citrato de sodio 3.2% (su efecto quelante con el calcio es reversible al aplicar CaCl₂, preserva la morfología celular, funcionalidad hemostática de las plaquetas y proporciona un mejor estímulo en la proliferación y migración) (Miron & Choukroun, 2017), se centrifugó a 450xg por 5 minutos (centrífuga de rotor oscilante Thermo), se separó cuidadosamente el plasma de la fase celular en tubos de 15 ml y se centrifugó nuevamente a 1400 xg por 5 minutos, se recolectó todo el plasma en nuevos tubos de 15 ml, evitando el pellet dónde quedan algunas células residuales. Luego se adicionaron 80 µl de plasma por pozo en platos de 96 y 500 µl en el caso de platos de 24 pozos, se agregó 60 µl y 375 µl de cloruro de calcio (CaCl₂) a una concentración de 50 mM (CaCl₂, Sigma) y se incubaron durante 5 horas con una humedad de 95% O₂ y 5% CO₂ a 37°C para lograr una completa polimerización. Se realizaron dos lavados con DPBS (Dulbecco's Phosphate Buffered Saline) para eliminar excedente de CaCl₂ y se procedió a sembrar la población celular de estudio. Obtención del suplemento líquido PGRF Para la obtención del suplemento sérico PGRF se usaron tubos de 8,5 ml con ACD-A para colectar la sangre de los tres donantes y se centrifugó a 580g por 10 min a temperatura ambiente en una centrífuga de rotor oscilante (Thermo). Posterior a la centrifugación se extrajo de cada tubo la fracción rica en plaquetas que corresponde a la mitad del suero inmediatamente por encima de la capa del buffy coat, y debajo la mitad superior que se considera plasma pobre en plaquetas. Se mezclaron los plasmas de los tres donantes para crear el pool que luego se centrifugó a 1400g por 10 minutos, y se descartó de nuevo una fracción de plasma pobre aproximadamente un tercio de lo obtenido. Al plasma rico en plaquetas (PRP) resultante del procedimiento anterior se le adicionó gluconato de calcio (0,5 ml /10 ml de plasma) y se realizaron 4 ciclos de congelamiento y descongelamiento de 37°C a -20 °C con el fin de generar lisis plaquetaria. Luego un 10% de PRGF se agregó al medio (DMEM bajo en glucosa), este se polimerizó por 4 a 6 horas a 37°C y se almacenó a -4°C. al utilizarlo se calentó a 37°C por una hora, se agito para despegar el biogel y se centrifugó a 4000g por 15 min. Para colapsar el coagulo y obtener todo el suplemento y el sobrenadante se filtra con acrodisco de 0,22µm. Obtención de FBS Se suero bovino fetal al 10% (Biowest), suplementado con medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) bajo en glucosa (Pantech). Obtención y cultivo de células madre Las hUCMSC fueron donadas por el banco de células de la empresa Exosomas SAS. Las células fueron colectadas de cordón umbilical humano y cultivadas en medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) bajo en glucosa (Pantech) suplementado con suero bovino fetal al 10%(Biowest) y 100 U/mL penicilina (Gibco), con una humedad de 95% y 5% CO2 a 37°C hasta obtener 3 a 5 pases. Para confirmar el fenotipo de las hUCMSC, se evaluó mediante citometría de flujo, los marcadores de membrana positivos para células madre mesenquimales CD44+, CD105+, CD73+ y CD90+ y los marcadores negativos CD11b-, HLA-DR-, CD45-, CD34- y CD19-. Determinación de la proliferación celular Para determinar el efecto de los suplementos séricos y el scaffold de fibrina sobre la proliferación celular, se sembraron las células hCUSCM de forma homogénea en placas de 96 pozos a una densidad de 10.000 células. por pozo, con DMEM bajo en glucosa (Pantech), 100 U/mL penicilina (Gibco) y con cada uno de los suplementos PGRF, FBS y S_FBR descritos en la Tabla 1. Grupos de estudio, bajo las condiciones de cultivo 95% de aire, 5% CO2, a 37 °C. Tabla 1 Grupos de estudio Grupo de Estudio (hCUSCM) Suplemento Scaffold PGRF FBS S-FBR 1 + - + 2 - + + 3 - - + Control + - - Control - + - Nota. Presencia +; Ausencia -; PGRF: Plasma Rico en Factores de Crecimiento; FSB: Suero Bovino Fetal; S-FBR: scaffold de Fibrina. Se determinó la cinética de proliferación celular a las 24 horas (T24) y a las 48 horas (T48), por medio del ensayo metabólico de MTT (bromuro de 3-(4,5 - dimetiltiazol -2-il)-2,5- difeniltetrazolio). Pasado el tiempo de cultivo a evaluar, se removió el medio y se lavó el pozo con 100 µl de DPBS y se reemplazó con 70 µL de medio de cultivo fresco. Se agregaron 30 µL de la solución preparada de MTT (concentración final de 0.5 µg/mL) a cada pozo, y se incubó con humedad a 37 ° C durante 4 horas. Se removió el medio de cada pozo y se lavó con DPBS, luego se agregó 100 µL de la solución SDS-HCl a cada pozo. Se incubó el plato a 37°C por 4 horas. Y se registró la absorbancia a 570 nm usando el lector de placas Multiskan GO para determinar número y porcentaje de células. Curva estándar MTT de hUCMSC Las hUCMSC fueron sembradas bajo condiciones estándar, en los grupos de estudio descritos en la Tabla 1. Para cada uno se realizó por triplicado diluciones seriadas de 50.000 a 97 células por pozo luego de 18 a 20 horas de adherencia se realizó el ensayo metabólico de MTT. Se removió el medio y se lavó el pozo con 100 µl de DPBS y se reemplazó con 70 µL de medio de cultivo fresco. Se agregaron 30 µL de la solución preparada de MTT (concentración final de 0.5 µg/ml) a cada pozo, y se incubó con humedad a 37°C durante 4 horas. Se removió el medio de cada pozo y se lavó con DPBS, luego se agregaron 100 µL de la solución SDS-HCl a cada pozo. Se incubó el plato a 37°C por 4 horas, y se registró la absorbancia a 570 nm. usando el lector de placas Multiskan GO. Se realizó una curva usando los puntos de la absorbancia relacionada con la cantidad de células para la condición de cultivo. Nivel de duplicación y tiempo de generación celular. Con los datos obtenidos a partir del ensayo de MTT el nivel de duplicación de la población (n) se obtuvo mediante la fórmula: n = log (N / No) × 3.33, donde n = número de generaciones (número de veces que la población celular se duplicará durante el intervalo de tiempo), N = número de células en el final del intervalo de tiempo y No = número de células al comienzo de un intervalo de tiempo. El tiempo de generación (G) se calculó mediante la fórmula: G = t / n (G = tiempo de generación; t = intervalo de tiempo en días, horas o minutos). Diferenciación celular Ensayo de mineralización in vitro Se determinó el potencial de diferenciación de las hUCMSC a células osteoprogenitoras, suplementando durante 21 días con DMEM alto en glucosa (Caissson) con 1% de antibiótico-antimicótico (Gibco), vitamina C (50 µg/ml, Sigma), β-glicerolfosfato (10 mmol/L, Sigma), dexametazona (0.1 umol/L, Sigma). Se sembraron 30.000 células en cada uno de los grupos de estudio propuestos en la Tabla 1. El cambio de medio se hizo cada tres días hasta alcanzar los 21 días y se evaluó la mineralización inicial con tinción de rojo de alizarina y Von Kossa, las células se fijaron en solución tampón neutra de formaldehído al 4% durante 15 min y luego se tiñeron con rojo de alizarina roja 40 mM (Sigma) se lavó y se realizó el registro fotográfico. Para la tinción de Von Kossa partiendo de la fijación en formaldehido 4%, luego en PBS por 10 min. Se lavaron con agua desionizada se añadió nitrato de plata al 5% (Sigma) y las muestras se expusieron a la luz ultravioleta durante 60 min. Las células se lavaron con tiosulfato de sodio al 5% (JT Barker) 3 veces antes de teñir con verde de metilo (Takara Bio USA Inc.) Evaluación de morfología de scaffolds Caracterización morfológica y determinación de diferenciación celular por microscopia electrónica de barrido (SEM, Jeol JSM 6490 LV, JEOL, München, Germany). Siguiendo el protocolo de diferenciación mencionado anteriormente hasta 21 días, en paralelo se sembraron los grupos control, es decir todos los grupos donde se evaluó el scaffold sin inducción de diferenciación hasta 21 días. Adicionalmente se polimerizó un scaffold al cual no se le sembraron células con el fin de observar la estructura de este. Todas las muestras fueron lavadas dos veces con DPBS y fijadas con Glutaraldehído grado microscopía durante 2 horas. Luego se lavaron con agua doble-destilada y se deshidrataron secuencialmente con Etanol al 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% cada uno durante 10 minutos finalmente se dejaron 10 minutos al 100% se retiró este alcohol y se dejó con nuevo alcohol al 100%, se retiró el alcohol y se realizó secado durante 24 horas. Las muestras fueron recubiertas con oro por pulverización catódica para el análisis en un microscopio electrónico de barrido (SEM) de alto vacío (Denton vacuum desk IV equipment, Moorestown, NJ, USA) para obtener imágenes de alta resolución. Confirmación de osteogénesis in vitro Se seleccionaron zonas de interés de los grupos de estudio con scaffold y se realizó en análisis de difracción de electrones por retrodispersión (EBSD, por su sigla en inglés) en zonas específicas de las muestras. Adicionalmente estas mismas zonas fueron seleccionadas para realizar la caracterización química de nanopartículas por medio de espectroscopia de rayos X de dispersión de energía (EDS, por su sigla en inglés). Se determinaron las concentraciones en peso expresado en porcentaje de los elementos químicos presentes en estas zonas principalmente calcio (Ca) y fósforo (P). Análisis estadístico Se realizó un análisis descriptivo mediante la estimación de las medidas de resumen (tendencia central, dispersión y posición) para los porcentajes de proliferación celular en los tiempos: 24 y 48 horas definidos para cada uno de los tratamientos y bloques experimentales (cada voluntario), también se evaluó el nivel de generación y tiempo de duplicación. La comparación de los promedios de proliferación celular según tiempos y grupos de estudio, se realizó a través de la prueba Anova de un factor y análisis de comparaciones múltiples mediante HSD de Tukey o Games Howell, previa verificación del cumplimiento de los supuestos de distribución normal y homocedasticidad de las varianzas con los estadísticos de Shapiro Wilk y Levene respectivamente. Todos los análisis se realizaron en el software IBM SPSS 27, se tomó un valor p de significancia estadística menor a 0,05 como criterio de rechazo de la hipótesis nula.spa
dc.format.extent90 páginasspa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.identifier.instnameUniversidad Nacional de Colombiaspa
dc.identifier.reponameRepositorio Institucional Universidad Nacional de Colombiaspa
dc.identifier.repourlhttps://repositorio.unal.edu.co/spa
dc.identifier.urihttps://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/88247
dc.language.isospaspa
dc.publisherUniversidad Nacional de Colombiaspa
dc.publisher.branchUniversidad Nacional de Colombia - Sede Medellínspa
dc.publisher.facultyFacultad de Cienciasspa
dc.publisher.programMedellín - Ciencias - Maestría en Ciencias - Biotecnologíaspa
dc.relation.referencesAlfonso, S. L., Mira, L. M., Castaño, S., Parada, M. T. & Arboleda, D. (2022). Ultrastructural characterization of human gingival fibroblasts in 3D culture. Cells, 11(22), 1-18. https://doi.org/10.3390/cells11223647spa
dc.relation.referencesAndrade, C., Ugarte, F., Inostroza, C., Díaz, P., Rosenberg, D., Pinto, N., & Quirynen, M. (2022). The impact of gender and peripheral blood parameters on the characteristics of L-PRF membranes. Journal of Oral Biology and Craniofacial Research, 12(6), 753-759. 10.1016/j.jobcr.2022.08.020spa
dc.relation.referencesAnitua, E. (1999). Plasma rich in growth factors: Preliminary results of use in the preparation of future sites or implants. International Journal of Oral and Maxillofacial Implants, 14(4), 529–535. PMID: 10453668spa
dc.relation.referencesAnitua, E., & Alkhraisat, M. H. (2020). Plasma rich in growth factors in the management of medically compromised patients in oral surgery. Journal of Biological Regulators and Homeostatic Agents, 34(2), 611-612. 10.23812/18-355-Lspa
dc.relation.referencesAnitua, E., Allende, M., Eguia, A., & Alkhraisat, M. H. (2022). Bone-regenerative ability of platelet-rich plasma following sinus augmentation with anorganic bovine bone: A systematic review with meta-analysis. Bioengineering (Basel), 9(10), 597. https://doi.org/10.3390/bioengineering9100597spa
dc.relation.referencesAnitua, E., De la Fuente, M., Troya, M., Zalduendo, M., & Alkhraisat, M. H. (2022). Autologous platelet-rich plasma (PRGF) preserves genomic stability of gingival fibroblasts and alveolar osteoblasts after long-term cell culture. Dentistry Journal, 10(9), 1-9. https://doi.org/10.3390/dj10090173spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Fernández-de-Retana, S., & Alkhraisat, M. H. (2021). Platelet-rich plasma in oral and maxillofacial surgery from the perspective of composition. Platelets, 32(2), 174-182. https://doi.org/10.1080/09537104.2020.1856361spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Flores, C., Fernández-de-Retana, S., Anitua, B. & Alkhraisat, M. H. (2023). Performance of immediately loaded short dental implants using low-speed drilling protocol and plasma rich in growth factors: A controlled retrospective observational study. International Journal of Periodontics and Restorative Dentistry, 43(2), 232-239b. 10.11607/prd.5203spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Fuente, M., Merayo, J. & Muruzabal, F. (2022). Optimization of a plasma rich in growth factors membrane for the treatment of inflammatory ocular diseases. Bioengineering, 9(10), 1-12. https://doi.org/10.3390/bioengineering9100508spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Muñoz, V., Aspe, L., Tierno, R., García, A., Goñi, F. & Pino, A. (2021). In vitro and in vivo effect of platelet-rich plasma-based autologous topical serum on cutaneous wound healing. Skin Pharmacology and Physiology, 35(1), 51-64. https://doi.org/10.1159/000517195spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Nurden, P., Prado, R., Nurden, A. & Padilla, S. (2019). Autologous fibrin scaffolds: When platelet- and plasma-derived biomolecules meet fibrin. Biomaterials, 192, 440-460. https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2018.11.029spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Piñas, L., & Alkhraisat, M. H. (2022). A novel technique for preparation of recipient site and autologous bone grafting in autotransplantation of single-rooted teeth: A report of two cases. Cureus, 14(11), e31888, 1-9. https://doi.org/10.7759/cureus.31888spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Prado, R., Azkargorta, M., Rodriguez-Suárez, E., Iloro, I., Casado-Vela, J., Elortza, F., & Orive, G. (2015). High-throughput proteomic characterization of plasma rich in growth factors (PRGF-Endoret)-derived fibrin clot interactome. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine, 9(11), E1-E12. https://doi.org/10.1002/term.1721spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Sánchez, M., Orive, G., & Andía, I. (2007). The potential impact of the preparation rich in growth factors (PRGF) in different medical fields. Biomaterials, 28(31), 4551–4560. https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2007.06.037spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Tejero, R., Zalduendo, M. & Orive, G. (2012). Plasma rich in growth factors promotes bone tissue regeneration by stimulating proliferation, migration and autocrine secretion on primary human osteoblasts. Journal of Periodontology, 84(8), 1180-1190. https://doi.org/10.1902/jop.2012.120292spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Troya, M., Tierno, R., Zalduendo, M. & Alkharaisat, M. (2021). The effectiveness of platelet-rich plasma as a carrier of stem cells in tissue regeneration: A systematic review of preclinical research. Cells, Tissues, Organs, 210(5-6), 339-350. https://doi.org/10.1159/000518994spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Zalduendo, M., & Troya, M. (2019). Autologous plasma rich in growth factors technology for isolation and ex vivo expansion of human dental pulp stem cells for clinical translation. Regenerative Medicine, 14(2), 97-111. https://doi.org/10.2217/rme-2018-0066spa
dc.relation.referencesAnitua, E., Zalduendo, M., Troya, M., & Alkhraisat, M. H. (2020). The influence of sodium citrate on the characteristics and biological activity of plasma rich in growth factors. Regenerative Medicine, 15(10), 2181-2192. https://doi.org/10.2217/rme-2020-0085spa
dc.relation.referencesAnitua E, Zalduendo M, Troya M, Padilla S, Orive G (2015) Leukocyte Inclusion within a Platelet Rich Plasma-Derived Fibrin Scaffold Stimulates a More Pro-Inflammatory Environment and Alters Fibrin Properties. PLoS ONE, 10(3): e0121713. https://doi:10.1371/journal.pone.0121713spa
dc.relation.referencesAnitua, E.; Zalduendo, M.; Troya, M.; Alkhraisat, M.H.; Blanco-Antona, L.A. (2022) Platelet-Rich Plasma as an Alternative to Xenogeneic Sera in Cell-Based Therapies: A Need for Standardization. Int. J. Mol. Sci. 23 (6552). https://doi.org/10.3390/ijms23126552spa
dc.relation.referencesAnitua, E.; Zalduendo, M.; Prado, R.; Troya, M.; Tierno, R.; de la Fuente, M.; Alkhraisat, M.H. (2024). The Biological Effect of Enriching the Plasma Content in Platelet-Rich Plasma: An In Vitro Study. Biomolecules 14 (1328) https://doi.org/10.3390/biom14101328spa
dc.relation.referencesBai, M. Y., Chuang, M. H., Lin, M. F., Tang, S. L., Wong, C. C. & Chan, W. P. (2018). Relationships of age and sex with cytokine content and distribution in human platelet fibrin gels. Scientific Reports, 8(10642), 1-9. https://doi.org/10.1038/s41598-018-28376-zspa
dc.relation.referencesBarros, A., Lozano, J., Queiruga, J., Fernández, L., Anitua, E., Alcalde, I. & Merayo, J. (2023). Recovery of corneal innervation after treatment in dry eye disease: A confocal microscopy study. Journal of Clinical Medicine, 12(5), 1841,1-16. https://doi.org/10.3390/jcm12051841spa
dc.relation.referencesBeeravolu, N., McKee, C., Alamri, A., Mikhael, S., Brown, C., Perez-Cruet, M., & Chaudhry, G. R. (2017). Isolation and characterization of mesenchymal stromal cells from human umbilical cord and fetal placenta. Journal of Visualized Experiments, 3(122), 55224. https://doi.org/10.3791/55224spa
dc.relation.referencesBi, J., Liu, Y., Liu, XM., Lei, S., Chen, X. (2020). Platelet-rich fibrin improves the osteo-/odontogenic differentiation of stem cells from apical papilla via the extracellular signal-regulated protein kinase signaling pathway. Journal of Endodontics, 46(5), 648-654. 10.1016/j.joen.2020.02.004spa
dc.relation.referencesBlanco, J., García Alonso, A., Hermida, L., & Castro, A. B. (2024). How to explain the beneficial effects of leukocyte- and platelet-rich fibrin. Periodontology 2000, 1-21. https://doi.org/10.1111/prd.12570spa
dc.relation.referencesCastro, A., Andrade, C., Li, X., Pinto, N., Teughels, W., & Quirynen, M. (2021). Impact of g force and timing on the characteristics of platelet-rich fibrin matrices. Scientific Reports, 11, 6038. https://doi.org/10.1038/s41598-021-85736-yspa
dc.relation.referencesChatree, K., Sriboonaied, P., Phetkong, C., Wattananit, W., Chanchao, C., & Charoenpanich, A. (2023). Distinctions in bone matrix nanostructure, composition, and formation between osteoblast-like cells, MG-63, and human mesenchymal stem cells, UE7T-13. Heliyon, 9(5), e15556, 1-16. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2023.e15556spa
dc.relation.referencesChen, G., Deng, C. X., & Li, Y. P. (2012). TGF-β and BMP signaling in osteoblast differentiation and bone formation. International Journal of Biological Sciences, 8(2), 272-288. https://doi.org/10.7150/ijbs.2929spa
dc.relation.referencesChoudhery, M. S., Mahmood, R., Harris, D. T., & Ahmad, F. J. (2022). Minimum criteria for defining induced mesenchymal stem cells. Cell Biology International, 46(6), 986-989. https://doi.org/10.1002/cbin.11790spa
dc.relation.referencesChoukroun, J., & Ghanaati, S. (2018). Reduction of relative centrifugation force within injectable platelet-rich-fibrin (PRF) concentrates advances patients' own inflammatory cells, platelets and growth factors: The first introduction to the low-speed centrifugation concept. European Journal of Trauma and Emergency Surgery, 44(1), 87-95. 10.1007/s00068-017-0767-9spa
dc.relation.referencesChoukroun, J., Adda, F., Schoeffler, C. & Vervelle, A. (2000). Une opportunité en paro-implantologie. Le PRF (Platelet Rich Fibrin). Implantodontie, 42, 55-62.spa
dc.relation.referencesConsejo de Organizaciones Internacionales de las Ciencias Médicas, Organización Mundial de la Salud. (2016). Pautas éticas internacionales para la investigación relacionada con la salud con seres humanos. https://cioms.ch/publications/product/pautas-eticas-internacionales-para-la-investigacion-relacionada-con-la-salud-con-seres-humanos/spa
dc.relation.referencesDai, P., Wu, Y., Gao, Y., Li, M., Zhu, M., Xu, H., Feng, X., Jin, Y., & Zhang, X. (2024). Multiomics analysis of platelet-rich plasma promoting biological performance of mesenchymal stem cells. BMC Genomics, 25(1), 564, 1-23. https://doi.org/10.1186/s12864-024-10329-8spa
dc.relation.referencesDao, T. T., Nguyen, C. T.-H., Vu, N. B., Le, H. T.-N., Nguyen, P. D.-N., & Pham, P. V. (2019). Evaluation of proliferation and osteogenic differentiation of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells in porous scaffolds. Advances in Experimental Medicine and Biology, 1084, 207-220. https://doi.org/10.1007/5584_2019_343spa
dc.relation.referencesDe Lima, R., Stellet, E., de Azeved, J. V., Rodrigues, N., Mourão, C. F., & Alves, G. (2023). The effects of platelet-rich fibrin in the behavior of mineralizing cells related to bone tissue regeneration—A scoping review of in vitro evidence. Journal of Functional Biomaterials, 14(10), 503, 1-35. https://doi.org/10.3390/jfb14100503spa
dc.relation.referencesDe Mori, A., Alasa, U. J., Mühlhölzl, A., & Blunn, G. (2023). Slipper limpet (Crepidula fornicata) shells support in vitro osteogenesis of human adipose-derived stem cells. Marine Drugs, 21(4), 248, 1-17. https://doi.org/10.3390/md21040248spa
dc.relation.referencesDepartamento Administrativo Nacional de Estadística DANE. (2020). Boletín técnico. Encuesta nacional de presupuestos de los hogares (ENPH). 2016 - 2017. https://www.dane.gov.co/files/investigaciones/boletines/enph/boletin-enph-2017.pdfspa
dc.relation.referencesDi Summa, F., Kargarpour, Z., Nasirzade, J., Stähli, A., Mitulović, G., Panić-Janković, T., Koller, V., Kaltenbach, C., Müller, H., Panahipour, L., Gruber, R., & Strauss, F.J. (2020). TGFβ activity released from platelet-rich fibrin adsorbs to titanium surface and collagen membranes. Scientific Reports, 10(1), 10203, 1-12. https://doi.org/10.1038/s41598-020-67167-3spa
dc.relation.referencesDiez, G. G., Anitua, E., Castellanos, N., Vázquez, C., Galindo, P., & Alkharaisat, M. H. (2022). The effect of mindfulness on the inflammatory, psychological, and biomechanical domains of adult patients with low back pain: A randomized controlled clinical trial. PLOS One, 17(11), e0276734, 1-19. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0276734spa
dc.relation.referencesDohan Ehrenfest, D. M., Andia, I., Zumstein, M. A., Zhang, C.-Q., Pinto, N. R., & Bielecki, T. (2014). Classification of platelet concentrates (platelet-rich plasma-PRP, platelet-rich fibrin-PRF) for topical and infiltrative use in orthopedic and sports medicine: Current consensus, clinical implications, and perspectives. Muscles, Ligaments and Tendons Journal, 4(1), 3-9. PMID: 24932440spa
dc.relation.referencesDohan Ehrenfest, D., Doglioli, P., Peppo, G., Del Corso, M., Charrier, JB. (2010). Choukroun’s platelet-rich fibrin (PRF) stimulates in vitro proliferation and differentiation of human oral bone mesenchymal stem cell in a dose-dependent way. Archives of Oral Biology, 55(3), 185–194. https://doi.org/10.1016/j.archoralbio.2010.01.004spa
dc.relation.referencesDohan, D., Del Corso, M., Diss, A., Mouhyi, J. & Charrier, JB. (2010). Three-dimensional architecture and cell composition of a Choukroun’s platelet-rich fibrin clot and membrane. Journal of Periodontology, 81(4), 546-555. https://doi.org/10.1902/jop.2009.090531spa
dc.relation.referencesDohan, D., Pinto, N., Pereda, A., Jiménez, P., Del Corso, M., Kang, BS., Nally, M., Lanata, N., Wang, HL. & Quirynen, M. (2018). The impact of the centrifuge characteristics and centrifugation protocols on the cells, growth factors, and fibrin architecture of a leukocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF) clot and membrane. Platelets, 29(2), 171-184. https://doi.org/10.1080/09537104.2017.1293812spa
dc.relation.referencesDohle, E., Schmeinck, L., Parkhoo, K., Sader, R., & Ghanaati, S. (2024). Platelet-rich fibrin as a bioactive matrix with pro-osteogenic and pro-angiogenic properties on human healthy primary cells in vitro. Platelets, 35(1), 2316744, 1-11. https://doi.org/10.1080/09537104.2024.2316744spa
dc.relation.referencesDouglas, T. E. L., Gassling, V., Declercq, H. A., Purcz, N., Pamula, E., Haugen, H. J., Chasan, S., de Mulder, E. L. W., Jansen, J. A., & Leeuwenburgh, S. C. G. (2012). Enzymatically induced mineralization of platelet-rich fibrin. Journal of Biomedical Materials Research Part A, 100(5), 1335-1346. https://doi.org/10.1002/jbm.a.34073spa
dc.relation.referencesDuan, X., Lin, Z., Lin, X., Wang, Z., Wu, Y., Ji, M., Lu, W., Wang, X., & Zhang, D. (2018). Study of platelet-rich fibrin combined with rat periodontal ligament stem cells in periodontal tissue regeneration. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 22(2), 1047-1055. https://doi.org/10.1111/jcmm.13461spa
dc.relation.referencesE. Editorial. (2008). Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial. Arbor, 184(730), 349–352. https://arbor.revistas.csic.es/index.php/arbor/article/view/183spa
dc.relation.referencesEl Bagdadi, K., Kubesch, A., Yu, X., Al-Maawi, S., Orlowska, A., Dias, A., Booms, P., Dohle, E., Sader, R., Kirkpatrick, C. J., Choukroun, J. & Ghanaati, S. (2019). Reduction of relative centrifugal forces increases growth factor release within solid platelet-rich-fibrin (PRF)-based matrices: A proof of concept of LSCC (low-speed centrifugation concept). European Journal of Trauma and Emergency Surgery, 45, 467-479. 10.1007/s00068-017-0785-7spa
dc.relation.referencesGarcía, C., Pino, A., Rodrigues, R., Segurado, G., Alegre, A., Jaén, P. & Anitua, E. (2022). An autologous topical serum derived from platelet-rich plasma therapy for the management of sensitive skin alterations: A case series report. Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology, 15, 2077-2086. https://doi.org/10.2147/CCID.S379323spa
dc.relation.referencesGBD 2017 Oral Collaborators, Bernabe, E., Marcenes, W., Hernández, C., Bailey, J., Abreu, L., Alipour, V., Amini, S., Arabloo, J., Arefi, Z., Arora, A., Ayanore, M., Bärnighausen, T., Bijani, A., Cho, D., Chu, D., Crowe, C., Demoz, G., Demsie, D. Dibaji, Z.,… Kassebaum, N. (2020). Global, regional, and national levels and trends in burden of oral conditions from 1990 to 2017: A systematic analysis for the Global Burden of Disease 2017 Study. Journal of Dental Research, 99(4), 362-373. https://doi.org/10.1177/0022034520908533spa
dc.relation.referencesGhanaati, S., Booms, P., Orlowska, A., Kubesch, A., Lorenz, J., Rutkowski, J., Landes, C., Sader, R., Kirkpatrick, C. J., & Choukroun, J. (2014). Advanced platelet-rich fibrin: A new concept for cell-based tissue engineering by means of inflammatory cells. Journal of Oral Implantology, 40(6), 679-689. https://doi.org/10.1563/aaid-joi-D-14-00138spa
dc.relation.referencesGiannini, S., Cielo, A., Bonanome, L., Rastelli, C., Derla, C., Corpaci, F., Falisi, G. (2015). Comparison between PRP, PRGF and PRF: Lights and shadows in three similar but different protocols. European Review for Medical and Pharmacological Sciences, 19(6), 927-930. PMID: 25855914spa
dc.relation.referencesGómez, B., Becerro, R., Losa, M. E. & Sánchez, R. (2007). Plasma rico en factores de crecimiento (PRGF). Revista Internacional de Ciencias Podológicas, 1(1), 7-10. ISSN: 1887-7249spa
dc.relation.referencesGreenwood, S. K., Hill, R. B., Sun, J. T., Armstrong, M. J., Johnson, T. E., Gara, J. P., & Galloway, S. M. (2004). Population doubling: A simple and more accurate estimation of cell growth suppression in the in vitro assay for chromosomal aberrations that reduces irrelevant positive results. Environmental and Molecular Mutagenesis, 43(1), 36-44. 10.1002/em.10207spa
dc.relation.referencesHatori, A., Yamakawa, D., Al-Maawi, S., Dohle, E., Chikira, J., Fujii, Y., Miki, M., Sader, R., Chikazu, D., Ghanaati, S., & Kawase-Koga, Y. (2023). Platelet-rich fibrin-conditioned medium as an alternative to fetal bovine serum promotes osteogenesis of human dental pulp stem cells. Bioengineering, 10(10), 1196, 1-12. https://doi.org/10.3390/bioengineering10101196spa
dc.relation.referencesHe, L., Lin, Y., Hu, X., Zhang, Y. & Wu, H. (2009). A comparative study of platelet-rich fibrin (PRF) and platelet-rich plasma (PRP) on the effect of proliferation and differentiation of rat osteoblasts in vitro. Oral and maxilofacial surgery | Oral and maxilofacial implant, 108(5), 707-713. https://doi.org/10.1016/j.tripleo.2009.06.044spa
dc.relation.referencesHermida, L., Barrachina, M. N., Morán, L. A., Bravo, S., Diz, P., García, Á., & Blanco, J. (2020). Deciphering the secretome of leukocyte-platelet-rich fibrin: Towards a better understanding of its wound healing properties. Scientific Reports, 10(1), 14571, 1-11. https://doi.org/10.1038/s41598-020-71419-7spa
dc.relation.referencesHerrera, D., Meyle, J., Renvert, S. & Jin, L. (2018). White paper on prevention and management of periodontal diseases for oral health and general health. FDI World Dental Federation. https://www.fdiworlddental.org/sites/default/files/2020-11/gphp-2018-white_paper-en.pdfspa
dc.relation.referencesHersant, B., Sid-Ahmed, M., Braud, L., Jourdan, M., Baba-Amer, Y., Meningaud, J.-P., & Rodriguez, AM. (2019). Platelet-rich plasma improves the wound healing potential of mesenchymal stem cells through paracrine and metabolism alterations. Stem Cells International, 2019(1), 1234263, 1-14. https://doi.org/10.1155/2019/1234263spa
dc.relation.referencesHong, S., Chen, W., & Jiang, B. (2018). A comparative evaluation of concentrated growth factor and platelet-rich fibrin on the proliferation, migration, and differentiation of human stem cells of the apical papilla. Journal of Endodontics, 44(6), 977-983. 10.1016/j.joen.2018.03.006spa
dc.relation.referencesIsono, M., Takeuchi, J., Maehara, A., Nakagawa, Y., Katagiri, H., Miyatake, K., Sekiya, I., Koga, H., Asou, Y., & Tsuji, K. (2022). Effect of CD44 signal axis in the gain of mesenchymal stem cell surface antigens from synovial fibroblasts in vitro. Heliyon, 8(10), e10739, 1-8. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2022.e10739spa
dc.relation.referencesIvanovic, A., Nikou, G., Miron, R., Nikolidakis, D. & Sculean, A. (2014). Which biomaterials may promote periodontal regeneration in intrabony periodontal defects? A systematic review of preclinical studies. Quintessence International, 45(5), 385-395. 10.3290/j.qi.a31538spa
dc.relation.referencesIviglia, G., Kargozar, S., & Baino, F. (2019). Biomaterials, current strategies, and novel nano-technological approaches for periodontal regeneration. Journal of Functional Biomaterials, 10(1), 3, 1-36. https://doi.org/10.3390/jfb10010003spa
dc.relation.referencesKačarević, Ž., Rider, P., Alkildani, S., Retnasingh, S., Pejakić, M., Schnettler, R., Gosau, M., Smeets, R., Jung, O. & Barbeck, M. (2019). An introduction to bone tissue engineering. International Journal of Artificial Organs, 43(2):69-86. https://doi.org/10.1177/0391398819876286spa
dc.relation.referencesKhurana, R., Bhasker, P. & Yawer, S. (2017). Comparative evaluation of the isolation and quantification of stem cells derived from dental pulp and periodontal ligament of a permanent tooth and to assess their viability and proliferation on a platelet-rich fibrin scaffold. Journal of Indian Society of Periodontology, 21(1), 16-20. 10.4103/jisp.jisp_182_16spa
dc.relation.referencesKirchner, F., Pinar, A., Milani, I., Prado, R., Padilla, S., & Anitua, E. (2020). Vertebral intraosseous plasma rich in growth factors (PRGF-Endoret) infiltrations as a novel strategy for the treatment of degenerative lesions of endplate in lumbar pathology: Description of technique and case presentation. Journal of Orthopaedic Surgery and Research, 15(72), 1-8. https://doi.org/10.1186/s13018-020-01605-wspa
dc.relation.referencesLangenbach, F., & Handschel, J. (2013). Effects of dexamethasone, ascorbic acid and β-glycerophosphate on the osteogenic differentiation of stem cells in vitro. Stem Cell Research & Therapy, 4(117), 1-7. https://doi.org/10.1186/scrt328spa
dc.relation.referencesLin, Z., Ríos, H. & Cochran, D. (2015). Emerging regenerative approaches for periodontal reconstruction: A systematic review from the AAP regeneration workshop. Journal of Periodontology, 86(2S), S134-S152. https://doi.org/10.1902/jop.2015.130689spa
dc.relation.referencesLiu, Y., Sun, X., Yu, J., Wang, J., Zhain, P., Chen, S., Liu, M. & Zhou, Y. (2019). Platelet-rich fibrin as a bone graft material in oral and maxillofacial bone regeneration: Classification and summary for better application. Biomed Research International, 2019, 3295756, 1-16. https://doi.org/10.1155/2019/3295756spa
dc.relation.referencesLordon, B., Campion, T., Gibot, L., & Gallot, G. (2024). Impact of trypsin on cell cytoplasm during detachment of cells studied by terahertz sensing. Biophysical Journal, 123(16), 2476-2483. https://doi.org/10.1016/j.bpj.2024.06.011spa
dc.relation.referencesMamajiwala, A. S., Sethi, K. S., Raut, C. P., Karde, P. A. & Mangle, N. M. (2020). Impact of different platelet-rich fibrin (PRF) procurement methods on the platelet count, antimicrobial efficacy, and fibrin network pattern in different age groups: An in vitro study. Clinical Oral Investigations, 24(5), 1663–1675. https://doi.org/10.1007/s00784-019-03022-8spa
dc.relation.referencesMarx, R., Carlson, E., Eichstaedt, R., Schimmele, S., Strauss, J. & Georgeff, K. (1998). Platelet-rich plasma. Growth factor enhancement for bone grafts. Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology, 85(6), 638–646. https://doi.org/10.1016/S1079-2104(98)90029-4spa
dc.relation.referencesMedved, L., & Weisel, J. (2022). The story of the fibrin(ogen) αC-domains: Evolution of our view on their structure and interactions. Thrombosis and Haemostasis, 122(6), 1265–1278. 10.1055/a-1719-5584spa
dc.relation.referencesMinisterio de Salud y Protección Social de Colombia. (2014). IV estudio nacional de salud bucal (ENSAB 2014). https://www.minsalud.gov.co/sites/rid/Lists/BibliotecaDigital/RIDE/VS/PP/ENSAB-IV-Situacion-Bucal-Actual.pdfspa
dc.relation.referencesMiron, R. J., Dham, A., Dham, U.,Zhang, Y., Pikos, M. A. & Sculean, A. (2019). The effect of age, gender, and time between blood draw and start of centrifugation on the size outcomes of platelet-rich fibrin (PRF) membranes. Clinical Oral Investigations, 23(8), 2179-2185. https://doi.org/10.1007/s00784-018-2673-xspa
dc.relation.referencesMiron, R., & Choukroun, J. (2017). Platelet rich fibrin in regenerative dentistry: Biological background and clinical indications. John Wiley & Sons Limited. DOI:10.1002/9781119406792spa
dc.relation.referencesMiron, R., Moraschini, V., Fujioka-Kobayashi, M., Zhang, Y., Kawase, T., Cosgarea, R., Soren, J., Bishara, M., Canullo, L., Shirakata, Y., Gruber, R., Ferenc, D., Calasans-Maia, M., Wang, H. & Sculean, A. (2021). Use of platelet-rich fibrin for the treatment of periodontal intrabony defects: A systematic review and meta-analysis. Clinical Oral Investigations, 25, 2461–2478. https://doi.org/10.1007/s00784-021-03825-8spa
dc.relation.referencesMoreno, A. I., Malagon, S., Ocampo, S., Leal-Marin, S., Ossa, E. A., Glasmacher, B., Garcia, C., & Pelaez-Vargas, A. (2024). In vitro evaluation of the osteogenic and antimicrobial potential of porous wollastonite scaffolds impregnated with ethanolic extracts of propolis. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 12, :1321466, 1-12. https://doi.org/10.3389/fbioe.2024.1321466spa
dc.relation.referencesMourão, C. F., Dohle, E., Bayrak, B., Winter, A., Sader, R., & Ghanaati, S. (2024). Leukocytes within autologous blood concentrates have no impact on the growth and proliferation of human primary osteoblasts: An in vitro study. International Journal of Molecular Sciences, 25(8), 4542, 1-16. https://doi.org/10.3390/ijms25084542spa
dc.relation.referencesNaji, A., Eitoku, M., Favier, B., Deschaseaux, F., Rouas-Freiss, N., & Suganuma, N. (2019). Biological functions of mesenchymal stem cells and clinical implications. Cellular and Molecular Life Sciences, 76, 3323-3348. https://doi.org/10.1007/s00018-019-03125-1spa
dc.relation.referencesNavarro, R., Pino, A., Martínez, A., Garrigós, E., Sánchez, M. L., Gallego, E. & Anitua, E. (2020). Combined therapy with Endoret-Gel and plasma rich in growth factors vs Endoret-Gel alone in the management of facial rejuvenation: A comparative study. Journal of Cosmetic Dermatology, 19(10), 2616-2626. https://doi.org/10.1111/jocd.13661spa
dc.relation.referencesNovello, S., Debouche, A., Philippe, M., Naudet, F., & Jeanne, S. (2019). Clinical application of mesenchymal stem cells in periodontal regeneration: A systematic review and meta‐analysis. Journal of Periodontal Research, 55(1), 1–12. https://doi.org/10.1111/jre.12684spa
dc.relation.referencesOneto, P., Zubiry, P. R., Schattner, M. & Etulain, J. (2020). Anticoagulants interfere with the angiogenic and regenerative responses mediated by platelets. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 8, 223, 1-12. https://doi.org/10.3389/fbioe.2020.00223spa
dc.relation.referencesOrganización de las Naciones Unidas. (2006). Declaración Universal sobre Bioética y Derechos Humanos. Biblioteca Digital UNESCO: https://unesdoc.unesco.org/ark:/48223/pf0000146180_spaspa
dc.relation.referencesOrive, G. & Anitua, E. (2021). Platelet-rich therapies as an emerging platform for regenerative medicine. Expert Opinion on Biological Therapy, 21(12), 1603-1608. https://doi.org/10.1080/14712598.2021.1936495spa
dc.relation.referencesPark, J., Park, C., Yi, T., Kim, S., Iwata, T. & Yun, J. (2020). rhBMP-2 pre-treated human periodontal ligament stem cell sheets regenerate a mineralized layer mimicking dental cementum. International Journal of Molecular Sciences, 21, 3767, 1-15. https://doi.org/10.3390/ijms21113767spa
dc.relation.referencesPham, P. Truong, N. C, Thi-Bich, P., Dang-Xuan, T., Bich, N., Hong-Thien, K. & Kim, N. (2016). Isolation and proliferation of umbilical cord tissue-derived mesenchymal stem cells for clinical applications. Cell and Tissue Banking, 17(2), 289-302. https://doi.org/10.1007/s10561-015-9541-6spa
dc.relation.referencesPulcini, S.; Merolle, L.; Marraccini, C.; Quartieri, E.; Mori, D.; Schiroli, D.; Berni, P.; Iotti, B.; Di Bartolomeo, E.; Baricchi, R.; et al. (2021) Apheresis Platelet Rich-Plasma for Regenerative Medicine: An In Vitro Study on Osteogenic Potential. Int. J. Mol. Sci. 22(8764). https://doi.org/10.3390/ijms22168764spa
dc.relation.referencesRamos, T. L., Sánchez-Abarca, L. I., Muntión, S., Preciado, S., Puig, N., López-Ruano, G., Hernández-Hernández, Á., Redondo, A., Ortega, R., Rodríguez, C., Sánchez-Guijo, F., & del Cañizo, C. (2016). MSC surface markers (CD44, CD73, and CD90) can identify human MSC-derived extracellular vesicles by conventional flow cytometry. Cell Communication and Signaling, 14(2), 1-14. https://doi.org/10.1186/s12964-015-0124-8spa
dc.relation.referencesRed Panamericana de Armonización de la Reglamentación Farmacéutica. (2010). Buenas prácticas de la OMS para laboratorios de control de calidad de productos farmacéuticos. Documento técnico No. 6. https://www3.paho.org/hq/dmdocuments/2011/Espanol-control-calidad-laboratorios-farmaceuticos.pdfspa
dc.relation.referencesResolución 04464 de 2002 [Ministerio del Medio Ambiente]. Por la cual se adopta el Manual de Procedimientos para la Gestión Integran de los residuos hospitalarios y similares. 6 de septiembre de 2002. D. O. No. 45009.spa
dc.relation.referencesResolución 8430 de 1993 [Ministerio de Salud de Colombia]. Por la cual se establecen las normas científicas, técnicas y administrativas para la investigación en salud. 4 de octubre de 1993.spa
dc.relation.referencesRíos, A., Fahandezh, H., Villanueva, M., Prado, R., Padilla, S. & Anitua, E. (2022). Office-based intraosseous infiltrations of PRGF in knee osteoarthritis: Description of technique. Arthroscopy Techniques, 11(5), e917-e921. 10.1016/j.eats.2022.01.009spa
dc.relation.referencesSaluja, H., Dehane, V. & Mahindra, U. (2011). Platelet-rich fibrin: A second-generation platelet concentrate and a new friend of oral and maxillofacial surgeons. Annals of Maxillofacial Surgery Journal, 1(1), 53-57. https://doi.org/10.4103/2231-0746.83158spa
dc.relation.referencesSanz, M., Dahlin, C., Apatzidou, D., Artzi, Z., Bozic, D., Calciolari, E., De Bryun, H., Dommisch, H., Donos, N., Eickholz, P., Ellingsen, J., Haugen, Håvard., Herrera, D., Lambert, F., Layrolle, P. Montero, E. Mustafa, K., Omar, O. & Schliephake, H. (2019). Biomaterials and regenerative technologies used in bone regeneration in the craniomaxillofacial region: Consensus report of group 2 of the 15th European Workshop on Periodontology on Bone Regeneration. Journal of Clinical Periodontology, 46(Suppl. 21), 82-91. https://doi.org/10.1111/jcpe.13123spa
dc.relation.referencesSchneider, M. R. (2021). Von Kossa and his staining technique. Histochemistry and Cell Biology, 156(6), 523-526. 10.1007/s00418-021-02051-3spa
dc.relation.referencesSerafini, G., Lopreiato, M., Lollobrigida, M., Lamazza, L., Mazzucchi, G., Fortunato, L., Mariano, A., Scotto, A., Fontana, M. & De biase, A. (2020). Platelet-rich fibrin (PRF) and its related products: Biomolecular characterization of the liquid fibrinogen. Journal of Clinical Medicine, 9(4), 1099. https://doi.org/10.3390/jcm9041099spa
dc.relation.referencesShanbhag, S., Suliman, S., Pandis, N., Stavropoulos, A., Sanz, M., & Mustafa, K. (2019). Cell therapy for orofacial bone regeneration: A systematic review and meta-analysis. Journal of Clinical Periodontology, 46(S21), 162-182. https://doi.org/10.1111/jcpe.13049spa
dc.relation.referencesSilva, F., Rodrigues da Silva, G., Sasso-Cerri, E., Simões, M. J., Cerri, P. S. (2015). Biology of bone tissue: Structure, function, and factors that influence bone cells. Biomed Research International, 2015(1), 421746, 1-17. https://doi.org/10.1155/2015/421746spa
dc.relation.referencesSimon, M., Major, B., Vácz, G., Kuten, O., Hornyák, I., Hinsenkamp, A., Kardos, D., Bagó, M., Cseh, D., Sárközi, A., Horvathy, D., Nehrer, S., & Lacza, Z. (2018). The Effects of Hyperacute Serum on the Elements of the Human Subchondral Bone Marrow Niche. Stem cells international, 2018, 4854619. https://doi.org/10.1155/2018/4854619spa
dc.relation.referencesSolakoglu, O., Heydecke, G., Amiri, N. & Anitua, E. (2020). The use of plasma rich in growth factors (PRGF) in guided tissue regeneration and guided bone regeneration: A review of histological, immunohistochemical, histomorphometrical, radiological and clinical results in humans. Annals of Anatomy, 231, 151528, 1-11. https://doi.org/10.1016/j.aanat.2020.151528spa
dc.relation.referencesStrauss, F. J., Nasirzade, J., Kargarpoor, Z., Stähli, A. & Gruber, R. (2020). Effect of platelet-rich fibrin on cell proliferation, migration, differentiation, inflammation, and osteoclastogenesis: A systematic review of in vitro studies. Clinical Oral Investigations, 24(2), 569-584. https://doi.org/10.1007/s00784-019-03156-9spa
dc.relation.referencesSuárez, C., Del Olmo, S., García, E., De la Fuente, M., Muruzabal, F., Anitua, E., Baamonde, B., Fernández, L., Fernández, L. & Merayo, J. (2020). Antioxidant role of PRGF on RPE cells after blue light insult as a therapy for neurodegenerative 7diseases. International Journal of Molecular Sciences, 21(3), 1021, 1-17. https://doi.org/10.3390/ijms21031021spa
dc.relation.referencesTan, L., Liu, X., Dou, H., & Hou, Y. (2020). Characteristics and regulation of mesenchymal stem cell plasticity by the microenvironment - Specific factors involved in the regulation of MSC plasticity. Genes and Diseases, 9(2), 296-309. https://doi.org/10.1016/j.gendis.2020.10.006spa
dc.relation.referencesThiagarajan, L., Lalitha, T., Abu-Awwad, H. A., & Dixon, J. E. (2017). Osteogenic programming of human mesenchymal stem cells with highly efficient intracellular delivery of RUNX2. Stem Cells Translational Medicine, 6(12), 2146-2159. https://doi.org/10.1002/sctm.17-0137spa
dc.relation.referencesVaquerizo, V., García, M., Mena, A., Prado, R., Padilla, S. & Anitua, E. (2023). Plasma rich in growth factors versus corticosteroid injections for management of chronic rotator cuff tendinopathy: A prospective double-blind randomized controlled trial with 1 year of follow-up. Journal of Shoulder and Elbow Surgery, 32(3), 555-564. 10.1016/j.jse.2022.08.017spa
dc.relation.referencesVon Euw, S., Wang, Y., Laurent, G., Drouet, C., Babonneau, F., Nassif, N., & Azaïs, T. (2019). Bone mineral: New insights into its chemical composition. Scientific Reports, 9(8456), 1-11. https://doi.org/10.1038/s41598-019-44620-6spa
dc.relation.referencesWang, H., Xie, Z., Hou, T., Li, Z., Huang, K., Gong, J., Zhou, W., Tang, K., Xu, J., & Dong, S. (2017). MiR-125b regulates the osteogenic differentiation of human mesenchymal stem cells by targeting BMPR1b. Cellular Physiology and Biochemistry, 41(2), 530-542. 10.1159/000457013spa
dc.relation.referencesWang, Z., Han, L., Sun, T., Wang, W., Li, X., & Wu, B. (2019). Preparation and effect of lyophilized platelet-rich fibrin on the osteogenic potential of bone marrow mesenchymal stem cells in vitro and in vivo. Heliyon, 5(10), e02739, 1-11. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2019.e02739spa
dc.relation.referencesYaja, K., Aungsuchawan, S., Narakornsak, S., Pothacharoen, P., Pantan, R. & Tancharoen, W. (2023). Combination of human platelet lysate and 3D gelatin scaffolds to enhance osteogenic differentiation of human amniotic fluid-derived mesenchymal stem cells. Heliyon, 9(8), e18599, 1-15. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2023.e18599spa
dc.relation.referencesYan, J., Xie, C., Zhu, J., Song, Z., Wang, Z., & Li, L. (2021). Effect of trypsin concentration on living SMCC-7721 cells studied by atomic force microscopy. Journal of Microscopy, 284(3), 203-213. https://doi.org/10.1111/jmi.13053spa
dc.relation.referencesYongxi, L., Xianghong, L., & Xiaohua, L. (2020). Recent advances in periodontal regeneration: A biomaterial perspective. Bioactive Materials, 5(2), 297–308. https://doi.org/10.1016/j.bioactmat.2020.02.012spa
dc.relation.referencesYou, JS., Kim, SG., Oh, JS., Kim, JS. (2019). Effects of platelet-derived material (platelet-rich fibrin) on bone regeneration. Implant Dentistry, 28(3), 244-255. 10.1097/ID.0000000000000877spa
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessspa
dc.rights.licenseReconocimiento 4.0 Internacionalspa
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/spa
dc.subject.armarcMedicina regenerativa
dc.subject.ddc600 - Tecnología (Ciencias aplicadas)spa
dc.subject.ddc660 - Ingeniería químicaspa
dc.subject.lembCélulas madre
dc.subject.lembMateriales biomédico
dc.subject.lembTejido oseo
dc.subject.proposalFibrina rica en plaquetasspa
dc.subject.proposalPlasma rico en factores de crecimientospa
dc.subject.proposalPlasma rico en plaquetasspa
dc.subject.proposalCélulas madre mesenquimalesspa
dc.subject.proposalProliferación
dc.subject.proposalOsteodiferenciaciónspa
dc.subject.proposalPlatelet-rich fibrinspa
dc.subject.proposalPlatelet-rich plasmaspa
dc.subject.proposalGrowth factor-rich plasmaspa
dc.subject.proposalMesenchymal stem cellseng
dc.subject.proposalOsteodifferentiationeng
dc.subject.proposalCell cultureeng
dc.subject.wikidataPlasma rico en plaquetas
dc.titleEfecto de scaffold de fibrina y suplementos séricos, sobre la proliferación de células madre mesenquimales y su diferenciación a osteoblastos in vitrospa
dc.title.translatedEffect of fibrin scaffold and serum supplements on mesenchymal stem cell proliferation and differentiation into osteoblasts in vitroeng
dc.typeTrabajo de grado - Maestríaspa
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdccspa
dc.type.coarversionhttp://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aaspa
dc.type.contentTextspa
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/masterThesisspa
dc.type.redcolhttp://purl.org/redcol/resource_type/TMspa
dc.type.versioninfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionspa
dcterms.audience.professionaldevelopmentPúblico generalspa
oaire.accessrightshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2spa
oaire.awardtitleEfecto de scaffold de fibrina y suplementos séricos, sobre la proliferación de células madre mesenquimales y su diferenciación a osteoblastos in vitrospa

Archivos

Bloque original

Mostrando 1 - 1 de 1
Miniatura
Nombre:
43865162.2025.pdf
Tamaño:
2.13 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descripción:
Tesis de Maestría en Biotecnología
Descargar

Bloque de licencias

Mostrando 1 - 1 de 1
Miniatura
Nombre:
license.txt
Tamaño:
5.74 KB
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descripción:
Descargar

Colecciones

Maestría en Ciencias - Biotecnología