Evaluación de la actividad anticancerígena In Vitro de péptidos sintéticos derivados de Lactoferricina Bovina en líneas celulares de cáncer de mama

Abstract

En este trabajo se evaluó el efecto citotóxico de péptidos sintéticos derivados de Lactoferricina Bovina (LfcinB) contra líneas celulares humanas derivadas de cáncer de mama. Para esto se sintetizaron péptidos monoméricos, diméricos, tetraméricos y cíclicos que contienen las secuencias, LfcinB (20-25): 20RRWQWR25; LfcinB (20-30): 20RRWQWRMKKLG30; [Ala19]-LfcinB (17-31): 17FKARRWQWRMKKLGA31 y LfcinB (21-25)Pal: RWQWRWQWR. Todos los péptidos fueron purificados mediante cromatografía RP-SPE, caracterizados por cromatografía RP-HPLC y espectrometría de masas MALDI-TOF. El efecto citotóxico fue evaluado en las líneas celulares humanas derivadas de cáncer de mama MDA-MB-468 (ATCC® HTB-132TM) y MDA-MB-231(ATCC® HTB-26TM). Se encontró que los péptidos diméricos y tetraméricos derivados de LfcinB (20-25), LfcinB (20-30) y [Ala19]-LfcinB (17-31) presentaron el mayor efecto citotóxico de manera selectiva y dependiente de concentración, estos resultados indican que la polivalencia de los péptidos incrementó el efecto citotóxico contra las líneas celulares evaluadas, sin embargo para la secuencia palindrómica LfcinB (21-25)Pal, los péptidos en forma monomérica y dimérica fueron presentaron el mayor efecto citotóxico contra las líneas HTB-132TM y HTB-26TM. Adicionalmente en este trabajo se estableció de manera preliminar que el mecanismo de acción citotóxico del péptido tetramérico LfcinB (20-25)4, contra la línea celular MCF-7 (HTB-22TM) está mediado por procesos apoptóticos. Este trabajo permitió identificar péptidos citotóxicos y selectivos los cuales pueden ser considerados promisorios para el desarrollo de agentes terapéuticos contra el cáncer de mama.

Abstract: In this study the cytotoxic effect of synthetic peptides derived from bovine lactoferricin (LfcinB) against human breast cancer cells lines were evaluated. For this purpose monomeric, dimeric, tetrameric and cyclic peptides were synthetized with the following sequence, LfcinB (20-25): 20RRWQWR25; LfcinB (20-30): 20RRWQWRMKKLG30; [Ala19]- LfcinB (17-31): 17FKARRWQWRMKKLGA31 y LfcinB (21-25)Pal: RWQWRWQWR. The RP-SPE, RP-HPLC chromatography and MALDI-TOF mass spectrometry techniques were used to purify and characterize all of peptides. The cytotoxic effect against MDA-MB-468 (ATCC® HTB-132™ y MDA-MB-231 (ATCC® HTB-26™) breasts cancer cells lines was evaluated. Dimeric and tetrameric peptides derivate from LfcinB (20-25), LfcinB (20-30) and [Ala19]-LfcinB (17-31) had showed the greatest selective cytotoxic effect in concentration-dependent manner, these results showed that the polyvalence enhance the cytotoxic effect of peptides against the evaluated cells lines. On the other hand, the linear palindromic sequence LfcinB (21-25)Pal and its dimershowed the higher cytotoxic effect against HTB-132™ y HTB-26™ cell lines. In addition, the apoptotic effect of tetrameric peptide LfcinB (20-25)4 against MCF7 (HTB22™) cell line was previously established. This work allowed to identify cytotoxic and selective peptides against breast cancer cells which be promissory in develop new therapeutic agents against breast cancer.