Expresión génica de IL-12, IL-6 y TNF –α en células dendríticas humanas infectadas In Vitro con Leishmania (V.) guyanensis y tratadas con Pentamidina

Abstract

El isetionato de pentamidina es una de las alternativas terapéuticas para el tratamiento de la leishmaniosis cutánea, enfermedad endémica en Colombia. A este medicamento se le han atribuido propiedades inmunosupresoras; sin embargo, estos estudios son limitados. Por tal razón se planteó evaluar el efecto del isetionato de pentamidina sobre la expresión génica de IL-12, IL-6 y TNF-α en células dendríticas humanas infectadas in vitro con promastigotes de L. (V.) guyanensis, para lo cual se utilizó el paquete globular de leucocitos obtenidos por leucoféresis (de donantes sanos de Bancos de sangre de la ciudad de Bogotá D.C), a partir de cuyos monocitos fueron diferenciadas las células dendríticas. Una vez obtenidas, las células dendríticas fueron infectadas con el parásito y tratadas con el isetionato de pentamidina. La producción y transcripción de las citoquinas fue determinada gracias a herramientas como la citometría de flujo y la PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) en tiempo real. Con el desarrollo de este proyecto se logró evidenciar que: (i) el efecto del isetionato de pentamidina es selectivo (asociado a la especie parasitaria) siendo las especies del nuevo mundo (particularmente Leishmania (V.) guyanensis) más susceptibles a este ingrediente farmacéutico activo, (ii) este antileishmanial tiende a ejercer actividad inmunomoduladora sobre células dendríticas humanas infectadas con Leishmania (V.) guyanensis, en cuanto a la expresión de IL-6 y del TNF-α.

Abstract. Pentamidine isethionate is a therapeutic alternative for the treatment of cutaneous leishmaniasis, endemic in Colombia. This drug has been attributed immunosuppressive properties, but these studies are limited. For this reason was to evaluate the effect of pentamidine isethionate on gene expression of IL-12, IL-6 and TNF-α on human dendritic cells infected in vitro with promastigotes of L. (V.) guyanensis, which was used for the buffy coat obtained by leukapheresis (from healthy donors of blood banks in the city of Bogotá), from whose monocytes were differentiated dendritic cells. Once obtained, the dendritic cells were infected with the parasite and treated with pentamidine isethionate. The transcription and production of cytokines was determined by tools such as flow cytometry and the real time PCR (reaction polymerase chain). With the development of this project was achieved show that: (i) the effect of pentamidine isethionate is selective (associated with the parasite species) being the New World species (particularly Leishmania (V.) guyanensis) more susceptible to pharmaceutical ingredient active and (ii) this antileishmanial tends to exert immunomodulatory activity on human dendritic cells infected with Leishmania (V.) guyanensis, regarding the expression of IL-6 and TNF-α.