Resistencia a glucocorticoides en células de leucemia linfoide aguda tipo b, podría estar mediada por la interacción del receptor de glucocorticoides con stat5

Abstract

La leucemia linfoblastica aguda (LLA) es una neoplasia que se caracteriza por la formación abundante de células linfoides inmaduras, capaces de desplazar las células normales presentes en la médula ósea. Para su tratamiento se usan glucocorticoides (GC), debido a su capacidad para inducir apoptosis en las células tumorales. Datos epidemiológicos revelan que aproximadamente un 20% de los pacientes pediátricos con LLA, muestran resistencia al tratamiento con GC. Lo anterior permite categorizar a los pacientes según su respuesta en GC-sensibles y GC-resistentes, siendo estos últimos quienes reportan un mal pronóstico en respuesta al tratamiento. Los mecanismos que explican la resistencia a GC en blastos leucémicos aún no se han descrito completamente; algunas investigaciones sugieren que los Transductores de Señal y Activadores de la Transcripción (STAT) podrían tener la capacidad para modificar la actividad transcripcional inducida por los GC. En concordancia con lo anterior, en este estudio se propuso que la posible formación de heterodímeros entre el receptor de glucocorticoides (GR) y STAT5b podría modular la actividad transcripcional inducida por GR, modificando la capacidad de respuesta a GC y manifestando insensibilidad a éste. Como modelo biológico se planteó el uso de las líneas linfocíticas de linaje B, SUP-B15 y CCRF-SB. Inicialmente se probó la respuesta de las líneas a prednisolona (PRED) mediante ensayo colorimétrico, donde se evidenció una disminución en la viabilidad de SUP-B15, comparada con CCRF-SB tanto a 24 y 48 h posteriores al tratamiento. También se evaluó el efecto de PRED en la inducción a muerte celular. Las células se trataron con 1,0 μM de PRED y se observó que el nivel de apoptosis es mayor en SUP-B15 comparado con CCRF-SB de forma dependiente del tiempo de exposición al medicamento. Ensayos de inmunoblot, permitieron ver la formación del complejo GR-STAT5b en citoplasma tanto en la línea sensible como la resistente, independiente de la presencia de PRED, en contraste la translocación del complejo al núcleo depende de la presencia del medicamento, lo que permite inferir la posibilidad de modulación de la actividad transcripcional de GR.

Abstract: Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a neoplasm that is characterized by the formation of immature lymphoid cells, capable of displacing normal cells present in the bone marrow. For its treatment glucocorticoids (GC) are used, due to its capacity to induce apoptosis in tumor cells. Epidemiological data reveal that approximately 20% of pediatric patients with ALL show resistance to treatment with GC. The above allows to categorize patients according to their response in GCsensitive and GC-resistant, which are the last ones that report a poor prognosis in response to treatment. The mechanisms that explain GC resistance in leukemic blasts have not yet been fully described; Some research suggests that the Signaling Transducers and Transcription Activators (STAT) may have the ability to modify the transcriptional activity induced by the GC. In agreement with the above, in this study it was proposed that the possible formation of heterodimers between the glucocorticoid receptor (GR) and STAT5b could modulate GR-induced transcriptional activity, modifying the ability to respond to GC and manifesting insensitivity to it. As a biological model, the use of line B, SUP-B15 and CCRF-SB lymphocyte lines was proposed. Initially the response of the lines to prednisolone (PRED) was tested by colorimetric assay, which showed a decrease in the viability of SUP-B15, compared with CCRF-SB both at 24 and 48 h after treatment. The effect of PRED on the induction of cell death was also evaluated. The cells were treated with 1.0 μM of PRED and the level of apoptosis is higher in SUP-B15 compared to CCRF-SB in a manner dependent on the time of exposure to the drug. Immunoblot assays allowed the formation of the GR-STAT5b complex in the cytoplasm in both the sensitive line and the resistant line, independent of the presence of PRED, in contrast the translocation of the complex to the nucleus depends on the presence of the drug, which allows inferring the possibility of modulation of GR's transcriptional activity.