Aislamiento, caracterización morfológica y molecular preliminar de Neospora Caninum de fetos bovinos abortados de Cundinamarca y Cesar

Abstract

En Colombia, se han reportado estudios de seroprevalencias de Neosporosis Bovina hasta del 90% y lesiones histopatológicas en fetos abortados provenientes de plantas de beneficio. Se tiene como objetivo contribuir a la caracterización morfológica y molecular de aislamientos de Neospora caninum de fetos bovinos abortados en fincas con características epizootiológicas de Neosporosis Bovina de Cundinamarca y Cesar. Se identificó mediante las técnicas de histopatología, inmunohistoquímica e inmunocitoquímica la presencia de N. caninum en cerebros de fetos abortados. Posteriormente, se obtuvo aislamientos clonales del protozoario en cultivos celulares. Fueron evaluados 6 fetos abortados, tejidos de dos terneros fallecidos días después de nacer, de una vaca adulta y una placenta. En los resultados de necropsia e histopatología se evidenciaron hemorragia, congestión y procesos autolíticos, siendo el cerebro el órgano más afectado. De igual manera, se observaron quistes tisulares en las muestras de tejido cerebral. Posteriormente, la presencia de N. caninum fue confirmada mediante inmunohistoquímica e inmunocitoquímica en todos los cerebros de fetos abortados, el cerebro de vaca adulta y placenta. En los aislamientos de N. caninum, se encontró efecto citopático a partir de las 24, 48 a 72 horas PI. Por su parte, el 100% de las muestras fueron positivas a la prueba de qPCR. En conclusión, la Neosporosis Bovina en Colombia es una enfermedad importante en el ganado. Los estudios de aislamiento, la morfología y la caracterización molecular contribuyen a ampliar los conocimientos sobre esta enfermedad. Además, pueden ser el punto de partida para los estudios que buscan establecer estrategias de control y prevención, y el desarrollo de técnicas estandarizadas para pruebas moleculares.

Abstract: In Colombia, Neosporosis Bovine seroprevalence studies have been reported. These studies showed about 90% of seroprevalence. Another study reported the histopathology lesions of aborted fetuses from slaughterhouses. The principal aim of this project is to contribute to the morphology characterization and isolation molecular of Neospora caninum of bovine aborted fetuses from two farmers of Cundinamarca and Cesar departments. Neospora caninum was identifying though histopathology, immunohistochemistry and immunocytochemistry assays. Then, this microorganism was isolate and cloned in cell cultures. Six aborted fetuses, tissues of two calves died later days of birth, one tissues of adult cow and a placenta were evaluated. Results of necropsy and histopathology showed hemorrhage, congestion, autolysis, being the brain the most affected organ. Tissues cysts were observed in brain tissues. Neospora caninum was confirmed in all brain samples of fetuses and adult cow through immunohistochemistry and immunocytochemistry. On the other hand, in the isolations of Neospora caninum, cytophatic effect was found between 24, 48 to 72 hours post infections. qPCR analysis indicated that all brain samples were positive for N. caninum In conclusion, the Neosporosis Bovine is a significant disease in cattle in Colombia. Isolation studies, morphology and molecular characterization contribute to expand the insights about this disease, and they can be the starting point for studies looking for establish strategies of control and prevention. Finally, create of standardized molecular techniques.