Contenido de glicopeptidolípidos, motilidad y formación de biopelículas en aislados clínicos de Mycobacterium colombiense

Abstract

Mycobacterium colombiense es una micobacteria perteneciente al Complejo Mycobacterium avium (MAC), aislada a partir de pacientes infectados con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) de la ciudad de Bogotá. M. colombiense ha sido relacionada con la producción de linfadenitis e infecciones pulmonares en pacientes inmunodeprimidos y VIH positivos en Colombia, España y Francia [1][2]. Hasta la fecha, las bases genéticas y morfológicas involucradas en el comportamiento fenotípico de las distintas cepas de M. colombiense son completamente desconocidas. En el presente trabajo se ha demostrado por primera vez que M. colombiense es una micobacteria motil y con capacidad de formar biopelículas (BP) restringida a cepas con morfología de colonia lisa. Hemos observado que las cepas de M. colombiense de morfología lisa contienen en su pared celular glicolípidos con un comportamiento cromatográfico similar a los glicopeptidolípidos (GPLs) de M. avium. Una variante natural rugosa de M. colombiense (57B) mostró ausencia de motilidad, una reducida capacidad de formar BP y sintetizar GPLs en las condiciones experimentales utilizadas en el presente estudio. Utilizando diferentes análisis bioinformáticos, se ubicó una agrupación de genes que podrían estar involucrados en la biosíntesis de GPLs en la cepa de referencia M. colombiense CECT 3035, cuya secuencia genómica se reportó recientemente. Por último, experimentos de qPCR, sugieren que la transcripción de genes posiblemente involucrados en actividades O-metiltransferasa y glicosiltransferasa podrían estar relacionados en la producción de GPLs de las distintas cepas de M. colombiense cultivadas en condiciones planctónicas y de motilidad.

Abstract. Mycobacterium colombiense is a novel member of Mycobacterium avium Complex (MAC) that produces respiratory and disseminated infections especially in immunosuppressed patients [1] [2]. At present, the morphologic and genetic bases involved in the phenotypic features of M. colombiense strains are completely unknown. In this study, we show for the first time that M. colombiense strains have the ability to biofilm formation and displayed motility restricted to strains with smooth morphology. In addition, Thin-layer chromatography analysis showed that strains displaying smooth morphology contain glycolipids that migrated as glycopeptidolipids (GPLs). A natural rough variant, M. colombiense 57B, displayed absence of motility and impaired capacity of both, biofilm formation and production of lipids with chromatographic behavior similar to GPLs. According to bioinformatic analyses, a gene cluster of GPLs biosynthesis for the recently sequenced M. colombiense CECT 3035 strain is proposed. Real-time PCR experiments suggested that transcription of genes possibly involved in methyl and glycosyl transfer activity could be correlated to diversity of glycolipids associated to GPLs in M. colombiense strains.