Diseño y caracterización de un sistema liposomal para la administración transdérmica de un péptido sintético con fines cosméticos

Abstract

El Acetilhexapeptido-3 (Ac-EEMQRR-NH2) es considerada una molécula con efecto anti-envejecimiento, cuya acción es similar a de la toxina botulínica. Su uso en formulaciones cosmecéuticas ha aumentado a pesar de que sus propiedades fisicoquímicas ponen en entredicho la capacidad de ser absorbido a través de la piel. Por tal motivo, en el presente trabajo se plantea el desarrollo de un sistema liposomal diseñado para su encapsulación, a fin de mejorar la capacidad de permear la piel después de la aplicación tópica. El péptido se obtuvo mediante síntesis química en fase sólida usando la estrategia Fmoc / tBu; se purificó utilizando extracción en fase sólida y luego se caracterizó por cromatografía líquida de alta eficiencia en fase reversa y espectrometría de masas (MS-IT-TOF) y dicroísmo circular. Los sistemas liposomales vacíos y cargados con el péptido se prepararon utilizando el método de emulsión-evaporación del disolvente orgánico y se caracterizaron en lo referido al diámetro promedio de vesícula, potencial zeta y eficiencia de encapsulación. Finalmente, se realizó un ensayo preliminar ex vivo, con el fin de determinar la capacidad de permear la piel del péptido encapsulado frente al péptido en solución acuosa. Los resultados mostraron que es posible obtener péptidos cortos de manera eficiente, en relativamente poco tiempo y bajo costo, con un alto grado de pureza y rendimiento. Por otra parte, se evidenció el potencial del sistema liposomal desarrollado como una herramienta para la administración del neuropéptido sintetizado químicamente. Los resultados pueden ser considerados como un valioso aporte en el diseño y desarrollo de productos cosmecéuticos basados en péptidos sintéticos.

Abstract. Acetylhexapeptide-3 is a molecule with anti-aging effect, which acts like the botulinum toxin. Its use in cosmeceutical formulations has been increasing in spite of its physicochemical properties, which do not allow the molecule to be easily absorbed by the skin. Therefore, in this paper we describe the peptide synthesis and the development a liposomal system designed for acetylhexapeptide-3 encapsulation, in order to improve the skin permeation ability after topical application. Peptide was synthesized by solid phase synthesis using the Fmoc/tBu strategy. The peptide was purified and characterized using RP-HPLC, ES-MS and DC. Empty liposomal and peptide loaded liposomal systems were prepared by reverse-phase evaporation vesicles methodology. Liposomal systems were physicochemical characterized for size, and zeta potential and the peptide encapsulation efficiency. Furthermore, in order to evaluate the transdermal permeability of encapsulated peptide versus its aqueous solution a preliminary ex vivo test using pig skin as model membrane was performed. Our results showed that it is possible to obtain short synthetic peptides by SPPS methodology with high purity degree and high yield, besides low-cost and fast. On the other hand, these results showed a potential delivery liposomal system for chemically synthesized neuropeptide in the as cosmeceutical development.