Potencial de aislamientos fúngicos nativos para el manejo de Diaphorina citri (Hemiptera: Liviidae)

Abstract

El cultivo de cítricos, representado principalmente por la naranja, la lima ácida y la mandarina, es considerado uno de los frutales más importantes a nivel mundial. La enfermedad causada por la bacteria Candidatus Liberibacter sp. y transmitida por el vector Diaphorina citri en América, es calificada como uno de los problemas fitosanitarios más devastadores en el cultivo. Una de las estrategias utilizadas para el control de la enfermedad hasta el momento, es el manejo del psílido asiático de los cítricos. Sin embargo, el principal método de control utilizado está relacionado con el uso de agroquímicos lo cual podría ocasionar residualidad en la fruta y resistencia por parte de los insectos. Estudiar la actividad patogénica de agentes microbianos como son los hongos, es fundamental para lograr alternativas más eficientes, con menos impacto ambiental y más duraderas en el tiempo. En el desarrollo de este trabajo se evaluó la virulencia de seis (6) aislamientos fúngicos de los géneros Beauveria bassiana, Purpureocillium lilacinum y Paecilomyces formosus sobre adultos de D.citri bajo un diseño completamente al azar (DCA) en dos sistemas de evaluación diferente, analizados con pruebas no paramétricas de Kruskal Wallis y prueba para comparación de medias de Dunn. De igual manera, se estimó la CL50 y el TL50 de los dos aislamientos más virulentos mediante análisis Probit y se evaluaron los genes diferencialmente expresados de Beauveria bassiana durante la interacción con Diaphorina citri a 12 y 24 horas posteriores a la inoculación mediante la técnica de RNAseq. Se detectó que los resultados de mortalidad y micosis fueron dependientes del sistema de evaluación y que hubo una disminución de estas variables en el sistema de brotes libres de suelo en comparación con las pruebas in vitro. La CL50 del aislamiento DC026- Beauveria bassiana fue de 4.65x107 conidias/ml en 4.17 días,. A partir de la interacción B. bassiana-D. citri fue posible detectar en total 511 genes diferencialmente expresados por parte del hongo en su proceso infectivo.

Abstract: Citrus crops, mainly represented by orange, acid lime and mandarine, are considered one of the most important fruits worldwide. The disease caused by the bacterium Candidatus Liberibacter sp. and transmitted by Diaphorina citri in America is classified as the most devastating phytosanitary issue affecting this crop. Nowadays, decreasing psyllid vector populations is the main strategy used for disease management. However, control relies mainly on synthetic pesticides which could be residual on fruits and induce insect resistance. Study of fungal pathogenesis on psyllid hosts is a key topic in order to achieve efficient control alternatives with lesser environmental impact. In this study, virulence of 6 fungal isolates was evaluated on adult D. citri individuals. Completely randomized design was applied on two evaluation systems. Non-parametric Kruskal Wallis test and Dunn's multiple comparison test were used for data analysis. Also, LC50 and LT50 values were estimated by Probit analysis for those systems. Differential expression analysis of genes based on RNA-seq data was performed on fungal isolate-D. citri interaction system at 12 and 24 hours after fungi inoculation. Results from experimental designs show that insect mortality and mycosis were system dependent and lower on soil-free shoot system than in in vitro assays. LT50 of DC026 isolate was 6.65x107 conidia/ml in 4.17 days. A total of 511 B. bassiana genes were detected as differentially expressed in the B. bassiana-D. citri pathosystem.