Detección del genotipo sexual en neohembras de Tilapia roja (Oreochromis sp.) mediante citogenética clásica y molecular en el valle del cauca

Abstract

La tecnología GMT ®(Tilapia genéticamente macho) se convierte en una alternativa viable para producir lotes monosexo machos de tilapia sin el uso de hormonas, pero como primer paso es necesario producir e identificar neohembras XY. El principal problema es identificar neohembras de hembras normales, sin necesidad de emplear pruebas de progenie que implica la producción de múltiples generaciones. El objetivo de este estudio fue producir ejemplares de neohembras de tilapia roja e identificar el genotipo de neohembras por citogenética clásica y molecular. Se feminizaron 800 larvas de tilapia suministrando una dosis de hormona 17β-estradiol a razón de 200mg/Kg de alimento por 30 días y un tratamiento control de 200 larvas sin hormona feminizante. A los 350g de peso se realizó sexaje manual por inspección de la papila urogenital y marcación con microchip para su posterior identificación. Los cromosomas se obtuvieron mediante la técnica de cultivo de linfocitos de sangre periférica y se emplearon las técnicas de bandeo cromosómico C, Q, G y NOR. Se genotipificaron los individuos de los dos tratamientos con el microsatélite UNH898, y se empleó una sonda que contenía el genotipo 260/290, específica para machos normales en la técnica FISH. Los resultados de los análisis mostraron que la especie Oreochromis sp., posee 2n=44 cromosomas y se encontraron patrones únicos de banda C sin evidencia de cromosomas sexuales. Se encontró un genotipo recurrente en machos, pero mediante citogenética molecular se logró evidenciar que no es exclusivo para machos porque hibridó en dispersiones cromosómicas de hembras.

//Abstract: GMT ® technology (genetically male tilapia) becomes a viable alternative to produce male monosex lots of tilapia without the use of hormones, but as a first step, it is necessary to produce and identify neofemales XY. The main problem is to identify neofemales of normal females, without the need to use progeny tests that involve the production of multiple generations. The objective of this study was to produce neofemales from red tilapia and identify the genotype of neofemales by classical and molecular cytogenetics. About 800 tilapia larvae were feminized by supplying a dose of 17β-estradiol hormone at a rate of 200 mg / kg of feed for 30 days and a control treatment of 200 larvae without a feminizing hormone. At 350g of weight, manual sexing was performed by inspection of the urogenital papilla and microchip marking for later identification. Chromosomes were obtained by the peripheral blood lymphocyte culture technique and then used chromosome banding techniques C, Q, G and NOR. Individuals of the two treatments were genotyped with the UNH898 microsatellite, and a probe containing the genotype 260/290, specific for normal males in the FISH technique, was used. The results of the analysis showed that the species Oreochromis sp., has 2n = 44 chromosomes and unique C-band patterns were found without evidence of sex chromosomes. A recurrent genotype was found in males, but through molecular cytogenetics it was found that it is not exclusive for males because it hybridized in female chromosomal dispersions.