El proceso de criopreservación induce daños irreversibles en espermatozoides equinos, estos daños se ven reflejados en disminución de la fertilidad del semen descongelado. En la membrana plasmática ocurren daños significativos después de que ésta comienza una transición desde el estado líquido a un estado en gel, lo cual sucede durante el descenso de la temperatura. En el estado de gel la membrana se vuelve más rígida y porosa, induciendo disrupciones y haciéndola susceptible a daños producidos por moléculas extracelulares y por cristales de hielo. Aunque se han logrado avances usando crioprotectores como el glicerol, estos pueden llegar a ser tóxicos para los espermatozoides de esta especie. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del colesterol y la dimetil formamida sobre la criosupervivencia del semen de caballos criollos colombianos. / Abstract: The freezing process induces irreversible damage in equine sperm, which is reflected in a decreased fertility of thawed semen. Significant damage is due to membrane changes during the transition from a liquid to a gel state, which occurs as the temperature decreases. In this latter state the membrane becomes rigid and porous inducing disruptions and making it susceptible to damage caused by molecules and extracellular ice crystals. Additionally; it has been reported that glycerol has a toxic effect when used as cryoprotectant on equine spermatozoa. The objective of this study was to evaluate the effect of cholesterol and dimethyl formamide on the cryosurvival of paso fino stallion sperm.