Estudio del Transporte de Péptidos a Través de Membranas con Permeabilidad Selectiva

Abstract

En este trabajo se estudió el transporte de tres péptidos a través de una membrana sintética tipo piel (Strat-M® SKBM02560). Los péptidos utilizados en este estudio (DM 1.14, DM1.16 y DM 1.18) son modificaciones de dos péptidos derivados de la Dermaseptina (DM 1.4 y DM 1.6) y se sintetizaron con la metodología en fase sólida (SPPS). El análisis de la estructura secundaria y el de algunas propiedades fisicoquímicas de los péptidos se hizo con herramientas de la bioinformática. Para el estudio del transporte a través de membrana se diseñaron celdas verticales de difusión tipo Franz. El transporte se llevó a cabo en presencia de solución amortiguadora de fosfato, a concentración isotónica con la sangre humana y a 37ºC. La caracterización del montaje experimental de las celdas de Franz y la implementación de la técnica analítica (RP-HPLC) para la cuantificación se hizo utilizando cafeína como sustancia testigo del transporte a través de membrana. Los datos experimentales del transporte se registraron como cantidad acumulada de sustancia transportada por unidad de área en función del tiempo. Después de someter a un análisis estadístico los datos experimentales, para tener confianza de que hay diferencias significativas en el transporte de las sustancias estudiadas, se estimaron los parámetros difusivos de la cafeína y de los péptidos mediante ajuste a la solución de un modelo tipo Fick, bajo la aproximación de dosis infinita. Los resultados obtenidos muestran que los parámetros difusivos hallados para cada sustancia tienen un valor característico, y que el péptido DM 1.14 propuesto en este trabajo es el que se transporta en mayor cantidad a través de la membrana sintética tipo piel. Estos resultados son promisorios hacia el desarrollo de nuevos productos farmacéuticos basados en biomoléculas sintéticas y de administración tópica para ser usados en el tratamiento, o como coadyuvante del tratamiento de enfermedades de origen parasitario.

In this work, the transport of three different peptides through a synthetic membrane skin-type (Strat-M® SKBM02560) was studied. The peptides used in this work (DM 1.14, DM1.16 y DM 1.18) were derived from the Dermaseptin (DM 1.4 y DM 1.6) and were synthetized with the solid phase peptide synthesis methodology (SPPS). The secondary structure and some of the physicochemical properties of the peptides were analyzed with tools of bioinformatics. To study the transport through the membrane some Franz type diffusion vertical cells were designed. The transport occurred in presence of a phosphate buffer solution, an isotonic concentration with the human blood at 37°C. The characterization of the experimental assembly of the Franz’ cells and the execution of the analytical technique (RP-HPLC) to quantify, was made using the caffeine as the reference substance of the transport through the membrane. The experimental data was recorded as an accumulate quantity of the substance transport by unit of area as a function of time. After performing a statistical analysis on experimental data, to stablish an confident result between the significant differences in the transport among the studied substances, some parameters of diffusion were estimated for caffeine and peptides by adjusting the solution of a type-Fick model under the approximation to the infinite doses. The results obtained show that the substances of this study have characteristically diffusive parameter values and the peptide DM 1.14, proposed in this work, has the highest quantity of transport through the synthetic skin type membrane. The results obtained in this work are promising to the development of new pharmaceutical products based on synthetic biomolecules and with a topic administration can be used as treatment or coadjutant of the treatment in conditions caused by parasites