Caracterización bioquímica, funcional y biológica del veneno de Crotalus durissus cumanensis colombiana
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Autores
Rodríguez Vargas, Ariadna Lorena
Director
Vega Castro, Nohora Angélica
Umaña Pérez, Yadi Adriana
Tipo de contenido
Trabajo de grado - Doctorado
Idioma del documento
EspañolFecha de publicación
2023
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Resumen
En el veneno de serpientes cascabel predomina la actividad neurotóxica de las
fosfolipasas tipo A2 (PLA2) y las miotoxinas de bajo peso molecular, además de los efectos
hemocitotóxicos relacionados con proteasas. Se evaluaron las diferencias bioquímicas y
biológicas en los venenos de Crotalus durissus cumanensis de tres ecorregiones de
Colombia: Magdalena Medio (MM), Caribe (CA) y Orinoquía (OR). Se realizaron SDSPAGE
y HPLC, letalidad, desfibrinación, procoagulación y actividades enzimáticas. Se
realizó el reconocimiento de los antivenenos, mediante determinación de dosis efectiva
(ED), Western blotting (WB) y ELISA. En los tres venenos, se encontraron proteasas y
PLA2, incluida la subunidad básica de crotoxina. Solo se detectó crotamina en el veneno
de CA. Hubo mayor letalidad, actividad coagulante, actividad fosfolipasa A2 y actividad
hialuronidasa para el veneno de MM. Se encontraron diferencias en el reconocimiento de
los antivenenos de uso comercial, colombiano y mexicano, por WB e inmunoafinidad.
Existe variabilidad intraespecífica, considerando las diferencias en la abundancia e
intensidad de los componentes, además de la actividad y respuesta a los antivenenos. La
lectina tipo C (CTL) del veneno pudo ser aislada parcialmente y aparece unida a una
serinoproteasa, al parecer por efecto de su glicosilación. Esta CTL mostró un efecto
proliferativo sobre líneas celulares. Se purificó crotamina y se modeló su estructura
tridimensional. Se demostró su efecto sobre la línea celular de cáncer de pulmón A549,
mostrando un interesante efecto pro-apoptótico. Además, se hizo un docking molecular
con una canal de potasio dependiente de voltaje, que también estaría involucrado en su
efecto citotóxico. (Texto tomado de la fuente)
Abstract
In rattlesnake venom, the neurotoxic activity of phospholipase A2 (PLA2) and low molecular
weight myotoxins predominates, in addition to protease-related hemocytotoxic effects.
Biochemical and biological differences in Crotalus durissus cumanensis venoms from three
ecoregions of Colombia: Magdalena Medio (MM), Caribe (CA) and Orinoquía (OR) were
evaluated. SDS-PAGE and HPLC, lethality, defibrination, procoagulation, and enzymatic
activities were performed. Recognition of antivenoms was achieved by determination of
effective dose (ED), Western blotting (WB) and ELISA. In all three venoms, proteases and
PLA2, including the basic crotoxin subunit, were found. Crotamine was only detected in CA
venom. There was higher lethality, coagulant activity, phospholipase A2 activity, and
hyaluronidase activity for the MM venom. Differences were found in the recognition of
commercially used antivenoms, Colombian and Mexican, by WB and immunoaffinity. There
is intraspecific variability, considering the differences in the abundance and intensity of the
components, as well as the activity and response to antivenoms. The C-type lectin (CTL)
of the venom could be partially isolated and appears bound to a serineprotease, apparently
due to its glycosylation. This CTL showed a proliferative effect on cell lines. Crotamine was
purified and its three-dimensional structure was modeled. Its effect on the A549 lung cancer
cell line was demonstrated, showing an interesting pro-apoptotic effect. In addition, a
molecular docking with a voltage-gated potassium channel was made, which would also
be involved in its cytotoxic effect.
Palabras clave
Descripción Física/Lógica/Digital
ilustraciones, fotografias, diagramas