Genotipificación y mutaciones asociadas a resistencia antimicrobiana en cepas de Mycoplasma gallisepticum y M. synoviae en aves comerciales de Colombia
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Resumen
La micoplasmosis aviar, causada por Mycoplasma gallisepticum (Mg) y Mycoplasma synoviae (Ms), afecta principalmente a aves reproductoras y ponedoras comerciales, y en menor medida a pollos de engorde, ocasionando cuadros clínicos respiratorios, reproductivos y sinovitis infecciosa de curso crónico. El diagnóstico y control de esta enfermedad se han visto complicados por la variación antigénica del patógeno. A pesar de su alta prevalencia y de la existencia de estrategias de prevención y control, para que estas sean efectivas es necesario identificar y caracterizar molecularmente las especies circulantes en el país. En este contexto, el objetivo de este estudio fue caracterizar genotipos y mutaciones asociadas con resistencia a antimicrobianos de Mycoplasma gallisepticum y M. synoviae en aves comerciales de Colombia. A partir de pooles muestras de aves comerciales provenientes de diferentes departamentos recolectadas entre 2019 y 2023, por medio del servicio de diagnóstico del Laboratorio de Biología Molecular y Virología, se analizaron 90 pooles de muestras clasificadas como Mg, Ms y detecciones simultáneas de Mg-Ms. A partir de genes housekeeping previamente reportados para ambas especies, se identificaron las muestras con perfiles alélicos completos mediante PCR convencional, seguida de secuenciación y análisis bioinformático. Las secuencias obtenidas se compararon con la base de datos PubMLST para asignar los respectivos alelos y establecer el perfil alélico de cada cepa. Como resultado, se obtuvieron 10 perfiles alélicos en las detecciones Mg, 11 en Ms y 15 en Mg-Ms. En el caso de Mg, el 70 % correspondió a una ST vacunal, mientras que el 30 % restante representó nuevas ST no reportadas previamente. Para Ms, más del 90 % de los perfiles correspondieron a nuevas ST tampoco reportadas anteriormente, mientras que dos muestras se relacionaron con aislados de Europa. Adicionalmente, se identificaron 14 ST con genotipos asociados a resistencia a fluoroquinolonas, con mutaciones en las regiones QRDR de los genes gyrA y parC, lo que evidencia la circulación de genotipos resistentes en cepas de campo. Estos hallazgos resaltan la necesidad de relacionar los genotipos identificados con los cuadros clínicos, el tipo de unidad avícola y su procedencia, para comprender mejor la epidemiología de la enfermedad en Colombia bajo el enfoque de Una Salud. Este estudio constituye la primera caracterización de micoplasmas aviares en el país mediante MLST, junto con la identificación de genotipos asociados a resistencia a los antimicrobianos (RAM) (Texto tomado de la fuente).
Abstract
Avian mycoplasmosis, caused by Mycoplasma gallisepticum (Mg) and Mycoplasma synoviae (Ms), mainly affect commercial breeding and laying birds, and to a lesser extent broiler chickens, causing respiratory and reproductive clinical symptoms and chronic infectious synovitis. The diagnosis and control of this disease have been complicated by the antigenic variation of the pathogen. Despite its high prevalence and the existence of prevention and control strategies, for these to be effective it is necessary to identify and molecularly characterize the species circulating in the country. In this context, the objective of this study was to characterize genotypes and mutations associated with antimicrobial resistance of Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae in commercial poultry in Colombia. From pools of commercial poultry samples from different departments collected between 2019 and 2023, 90 pools of samples classified as Mg, Ms, and simultaneous detections of Mg-Ms were analyzed using the diagnostic service of the Molecular Biology and Virology Laboratory. Based on previously reported housekeeping genes for both species, samples with complete allelic profiles were identified using conventional PCR, followed by sequencing and bioinformatic analysis. The sequences obtained were compared with the PubMLST database to assign the respective alleles and establish the allelic profile of each strain. As a result, 10 allelic profiles were obtained in Mg detections, 11 in Ms, and 15 in Mg-Ms. In the case of Mg, 70% corresponded to a vaccine ST, while the remaining 30% represented new STs not previously reported. For Ms, more than 90% of the profiles corresponded to new STs that had not been previously reported, while two samples were related to isolates from Europe. In addition, 14 STs with genotypes associated with fluoroquinolone resistance were identified, with mutations in the QRDR regions of the gyrA and parC genes, which show the circulation of resistant genotypes in field strains. These findings highlight the need to link the identified genotypes with clinical pictures, the type of poultry unit, and its origin to better understand the epidemiology of the disease in Colombia under the One Health approach. This study constitutes the first characterization of avian mycoplasmas in the country using MLST, together with the identification of genotypes associated with antimicrobial resistance (AMR).
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