Evaluación in vitro del efecto del material particulado y un potencial tratamiento en dos líneas celulares

Abstract

La interacción de los sistemas biológicos con agentes externos puede representar una desregulación de la homeóstasis celular al generar procesos tóxicos, por esto se hace necesario evaluar la exposición a las diferentes propuestas de ingeniería en todos los campos del desarrollo. Teniendo en cuenta esto, el objetivo del estudio fue evaluar la citotoxicidad y genotoxicidad del material orgánico extraíble (MOE) proveniente de diésel y diésel con mezclas de alcoholes y nanopartículas (NPs) del copolímero de ácido láctico y glicólico (PLGA) y la expresión diferencial de proteínas tras la exposición al MOE. Esto se logró llevando a cabo el ensayo de MTT para determinar la citotoxicidad de estos compuestos, para la evaluación de genotoxicidad se realizó el ensayo de electroforesis alcalino de células individuales (ensayo Cometa) y para la evaluación de la mutagenicidad de Nps se realizó el test de AMES. Posteriormente, para evaluar la expresión diferencial de proteínas, se realizó la extracción de proteínas totales y mediante geles de una dimensión (1D) se evaluó integridad y estabilidad, para la generación de los perfiles proteicos se realizó una electroforesis de dos dimensiones (2D) y las proteínas que se encontraron diferencialmente expresadas frente al control negativo se caracterizaron mediante espectrometría de masas (MALDI-TOF/TOF). Los resultados indicaron efectos genotóxicos, pero no citotóxicos tras la exposición a MP y Nps y no se evidenció mutagenicidad mediada por Nps. En cuanto a la expresión diferencial de proteínas tras la exposición al MOE, se evidenció sobreexpresión de proteínas relacionadas con el estrés oxidativo. En conjunto estos resultados resaltan la necesidad de probar nuevas tecnologías y compuestos a los cuales pueden expuestos los sistemas biológicos. (Texto tomado de la fuente)

The particulate matter (PM) of diesel fuels is a complex mixture that can vary depending on the characteristics of the engine, its type, the type of fuel and the source of production, it has been shown to have negative effects on environmental health and For this reason, the need has been generated to test alternative fuels that may have less effect on biological systems, taking this into account, the cytotoxicity and genotoxicity of the organic fraction of the particulate material of engines fed with alternative fuels corresponding to diesel was evaluated. . Mixed with alcohols (10% ethanol and butanol) by in vitro tests using the HepG2 cell line, cytotoxicity was evaluated by the MTT colorimetric test and genotoxicity by the comet test. A low cytotoxicity of the extracts was found, but a high genotoxicity, showing statistically significant differences between the negative control and the different treatments in all the concentrations tested, with this it is concluded that the organic fraction of the PM has a genotoxic effect that can lead to imbalances of cellular homeostasis.